PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit
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Takara R022A PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,351 PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
Takara R022B (A × 4) PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥4,866 PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
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PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量*1)
PrimeScript RTase (for 2 step) 25 μl
5×PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
PrimeSTAR Max Premix (2×) 625 μl × 2
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1 ml
   
*1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl,2 Step RT-PCR时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
Limited Use Label License: [M54]  
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase,PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶,模板浓度适用范围广,可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。
2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程,2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点:
1. 能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。
2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且,也可以进行1 Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
-20℃。
注意:PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后,已确认其活性没有发生改变,但要注意尽量避免冻融次数过多。
 
■ 试剂盒特点
使用2 Step RT-PCR标准操作流程时
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   6 kb产物
       反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度在42℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)
       RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物   Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择
 
使用1 Step RT-PCR操作流程时
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   6 kb产物
       反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度50℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)
       RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物   使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物)
  (不可使用Random 6 mers及Oligo dT Primer)
       操 作   在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应