核酸清除剂 DNA Cleaner


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
045-30741 DNA Cleaner
核酸清除剂
5ml
044-30711 25bp DNA Step Ladder (25-500bp) 500μL(100色带)
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  • 参考文献

核酸清除剂 核酸清除剂                   DNA Cleaner

DNA Cleaner

◆原理


核酸清除剂                   DNA Cleaner

       本品不需要使用有机溶剂或离心管,35分钟内即可高效清除50bp 以下DNA 片断。另外,本品还可用于dsRNA 的纯化。最适合用于PCR 后的引物、引物对、dNTP、DNA 聚合酶的清除和限制性内切酶处理后的酶消除。同时,利用乙醇沉淀法将ABI 公司BigDye Cycle Sequencing kit 扩增序列的DNA 样品纯化时,使用本品能得到清晰的序列结果。

特点

● 不需要使用分离管柱,也可纯化PCR扩增产物
● 高效浓缩500 ~ 2,500ng 的DNA
● 最快35分钟即可完成PCR后的核酸纯化

◆案例应用

去除底物

去除底物二聚体

去除dNTP

DNA 纯化

测序用
    标记反应后纯化

酶去除

操作时间

处理容量

○100~10,000 bp

最短35分钟

与最初样品相同容量

操作摘要


核酸清除剂                   DNA Cleaner


与柱色谱法相比


 

DNA Cleaner

Q公司柱色谱法

Step 1

添加与DNA溶液等量的DNA Cleaner。

向PCR样品中添加5倍容量的结合液。此时,若混合物的颜色不为黄色,请添加3M醋酸钠。

Step 2

在室温下静置10分钟。

向离心管中添加Step 1.的样品。

Step 3

在室温下离心分离10分钟。

在室温下离心分离1分钟。

Step 4

除去上清液。添加70%乙醇。

除去滤液。添加洗涤液。

Step 5

在室温下离心分离1分钟。

在室温下离心分离1分钟。

Step 6

上清除去。干燥5分钟。

除去滤液。

Step 7

TE Buffer、灭菌水溶解

在室温下离心分离10分钟。

Step 8

FINISH

添加50μL析出液。静置1分钟。

Step 9

直接向分离管膜中添加析出液。

Step 10

在室温下离心分离10分钟。

Step 11

FINISH

所需时间

约35分钟

约10分钟

离心分离次数

2次

4次



1)低分子DNA(50bp 以下)的除去

核酸清除剂                   DNA Cleaner


条带1.:DNA Step Ladder (25-500bp)

条带2.:DNA Step Ladder (25-500bp)(DNA Cleaner 处理)

条带3.:DNA Step Ladder (25-500bp)(T 公司Kit)

条带4.:DNA Step Ladder (25-500bp)(Q 公司Kit)


图1 利用DNA Cleaner 去除50bp 以下的DNA 片断

使用本品可去除50bp及25bp的DNA 片断,可回收75bp 以上的DNA片断。与Q 公司Kit一样,可高效去除50bp 以下的DNA片断。

2)高分子DNA(200bp 以上)的回收

核酸清除剂                   DNA Cleaner


条带1.:DNA Ladder

条带2.:DNA Ladder (DNA Cleaner 处理)

条带3.:DNA Ladder (T 公司Kit)

条带4.:DNA Ladder (Q 公司Kit)



图2 利用DNA Cleaner 纯化高分子量DNA 片断

使用本品可高效回收200bp 以上的DNA片断。

3)少量DNA 的回收率比较

核酸清除剂                   DNA Cleaner


[使用DNA]3kb 质粒

[DNA 量检测法]检测OD260/OD280吸光度,估算已回收DNA的量。


图3  利用DNA Cleaner 进行质粒DNA 添加回收实验

使用本品进行100 ~ 2,500ng 的DNA 回收实验,其结果比Q 公司Kit 更高效去除DNA,对500ng 以上的DNA 回収率达90% 以上。



※操作成本(5mL)

处理前,核酸溶液的容量关系,请参考:

10μL → 500 tests

50μL → 100 tests

100μL → 50 tests