arcticzymes T4 DNA连接酶说明书

 

arcticzymes T4 DNA连接酶说明书

 

T4 DNA Ligase

Quantity Product information Article no. Price

Pack size:

250 kUConc.: 5000 U/µl #71800-202 €26

71800-100

T4 DNA连接酶是一种依赖ATP和Mg 2+的dsDNA连接酶,可催化双链DNA,双链RNA和某些DNA / RNA中3'-羟基和5'-磷酸末端之间的磷酸二酯键的形成。T4 DNA连接酶在平末端和内聚末端底物上均具有活性。

 

 

HL-Exol

 

产品信息 货号 价格

装箱量:2500 U浓度:> 20 U / µl #70100-201 $ 61

装箱尺寸:50 kU浓度:> 20 U / µl #70100-150

 

HL-ExoI是3'-5'核酸外切酶,特异于单链DNA。HL-ExoI在≥25°C的温度下有活性,并在80°C下孵育1分钟或在60°C下孵育15分钟使其失活。表达源自北极海洋细菌的HL-ExoI基因的大肠杆菌菌株中重组产生

单位定义: 一个单位可在25°C下在30分钟内催化释放10 nmol的酸溶性核苷酸。反应缓冲液:25°C时20 mM Tris-HCl pH 7.5、200 mM NaCl,20 mM MgCl 2,1 mM DTT,0.01%Triton X-100、2.5%甘油和3 H-dATP标记的DNA(25 ng / µl)。

比活度:  > 50 000 U / mg。

储存缓冲液:  10 mM Tris-HCl pH 7.5(在25°C下),200 mM NaCl,10 mM MgCl 2,1 mM DTT,0.01%(v / v)Triton X-100、50%(v / v)甘油。

储存条件: -20°C。

 

arcticzymes T4DNA连接酶说明书

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T4 DNA Ligase

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Article no.

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T4 DNA Ligase Pack size: 250 kU quantity

Pack size: 250 kUConc.: 5000 U/µl

#71800-202

$28

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Pack size: According to agreementConc.: According to agreement

#71800-100

REQUEST QUOTE

 

 

  • 描述

T4 DNA连接酶是ATP和Mg 2+依赖性dsDNA连接酶,其催化双链DNA,双链RNA和一些DNA / RNA杂合体中3'-羟基和5'-磷酸末端之间的磷酸二酯键的形成。T4 DNA连接酶在平末端和粘性末端底物上都有活性。

 

jembio DNA连接酶说明书

jembio DNA连接酶说明书

DNA连接酶(大肠杆菌)

DNA 连接酶(大肠杆菌)催化双链 DNA 中并列的 5' 磷酸和 3' 羟基粘性末端之间形成磷酸二酯键。

描述:

• 催化具有粘性末端的双链 DNA 片段之间形成磷酸二酯键。

• 5'-磷酰基与相邻的 3'-羟基的缩合伴随着 NAD+ 的水解。

• 适用于全长cDNA(1、2)的高效克隆。

单位定义:一个单位定义为产生 50% 的 λ DNA 的 Hind III 片段连接所需的酶量。

在 20 µl DNA 末端浓度为 0.02 µM (50 µg/ml) 的测定混合物中在 16oC 下孵育。

储存条件:储存于-20oC。

反应缓冲液:30 mM Tris-HCl(22°C 时 pH 8.0)、1 mM 二硫苏糖醇、4 mM MgCl2、26 µM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白。

最佳连接发生在 16°C。

储存缓冲液:10 mM Tris-HCl(22°C 时 pH 7.4)、50 mM KCl、0.1 mM EDTA、10 mM 硫酸铵、1 mM 二硫苏糖醇和 50% (v/v) 甘油。

质量控制:所有制备物都经过了内切核酸酶和外切酶活性的污染测试,以及连接反应中的功能测试。

连接分析条件:30 mM Tris-HCl(22°C 时 pH 8.0)、4 mM MgCl2、1.2 mM EDTA、1 mM 二硫苏糖醇、0.026 mM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白和 λ DNA 的 Hind III 片段。在 16°C 下孵育 30 分钟。

avidity BirA生物素蛋白连接酶说明书

avidity BirA生物素蛋白连接酶说明书

 

BirA500-BirA500:BirA生物素-蛋白质连接酶标准反应试剂盒,250.00美元

 

 

BirA生物素蛋白连接酶(EC 6.3.4.15)激活生物素形成5'-腺苷酸生物素,并将生物素转移至生物素受体蛋白(例如AviTag™肽)。它还起着生物素操纵子阻遏物的作用。该蛋白质由birA基因编码。

请注意:我们强烈建议使用AviTag™氨基酸序列,而不是其他生物素化肽序列。BirA酶以2倍于天然底物(BCCP)的反应速率对AviTag™序列进行生物素化处理,并且比使用中的其他肽序列高出一个数量级或更多。与其他Biotinylation-of-Peptide序列相比,AviTag™需要较少的酶量和较短的孵育时间,从而大程度地减少了与蛋白酶和蛋白质不稳定性相关的辅助问题。

 

产品信息

套件随附以下内容:

  • 两(2)个小瓶,每瓶20uL 1mg / mL BirA生物素蛋白连接酶(总共40ug)
  • 两(2)个每瓶1.5mL的BiomixA(0.5M Bicine缓冲溶液,pH 8.3)
  • 两(2)个每瓶1.5mL的BiomixB(100mM ATP,100mM Mg(OAc)2、500uM d-生物素)
  • 两(2)个每小瓶1.5mL的BIO-200(500uM d-生物素)

BirA生物素蛋白连接酶(EC 6.3.4.15)通过ATP中间体(生物素5'-腺苷酸)以高效,针对性的方式将d-生物素共价添加到生物素受体肽/蛋白质上。酶促生物素化蛋白的下游应用是多种,重要和强大的。通常利用*的生物素-亲和素/链霉亲和素相互作用来进行亲和层析或将蛋白质固定在表面或底物上。通过抗生物素抗体或抗生物素蛋白/链霉亲和素-报告酶偶联物(-HRP,-碱性磷酸酶)或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化的MHC分子的多聚体形式是免疫生物学中流行的工具。

当与我们的AviTag™生物素受体肽氨基酸序列结合使用时,生物素化作用是天然大肠杆菌BCCP底物的两倍,并且比其他肽序列生​​物素化作用高一个数量级或更多。因此,与其他可用序列相比,AviTag™序列需要更少的BirA酶和较短的孵育时间即可完成生物素化反应。如果需要考虑蛋白质的不稳定性或蛋白酶活性,这对于下游的成功可能很重要。

我们的BirA酶是野生型大肠杆菌,由birA基因编码,并通过传统方法纯化至纯度超过99%。该酶的其他名称包括:生物素连接酶;生物素操纵子阻遏蛋白 birA; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰-CoA-羧化酶]连接酶;生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;生物素:脱羧羧化酶连接酶;生物素全酶合成酶;HCS。

Avidity BirA酶(生物素连接酶)说明书

Avidity,LLC于1996年由Millard Cull,Larry Lansing,Ron Gill博士和Mark Seville博士创立,基于生物素对抗生物素蛋白或链霉亲和素的非凡亲和力开发肽标签和分子生物学产品。在Affymax担任研究人员的同时,Millard参与了AviTag技术的发现,发现了其商业潜力,并获得了Affymax的*权利。他开始使用Avidity作为试剂公司,将AviTag技术的使用权授予其他公司,并销售与该技术一起使用的产品。

带有AviTag标签的人类全长ORF克隆已经被构建在多种T7和CMV启动子表达系统,可以立即购买使用。AviTag标签蛋白可以被体内或体外的生物素连接酶生物素化,而且抗生物素蛋白或链霉亲和素可以专一地与生物素结合,正基于这两个反应,AviTag?技术可以应用于蛋白的固定,纯化和显影。 虽然Avidity是一个小公司,科学带来的好处及其AviTag已得到认可。目前, AviTag技术已经在22个国家的世界制药公司和研究人员中得到认可。 

随着Avidity成熟,该公司正在扩大其科学视野,并调查使用生物发光 – 如在深海生物体中发现 – 使其产品对科学界更有用。Prolume有限公司的Bruce Bryan博士于2004年接触AvidTag与Prolume的高斯荧光素酶和绿色荧光蛋白(GFP)结合使用。*款高斯AviTag产品于2007年11月发布。

此外,Avidity正在与几家公司合作,通过将非常灵敏的光学传感器与基于荧光素酶的测定相结合,开发出新一代高度移动,简单,廉价且功能强大的诊断功能。结合BP蛋白质组学(新型测定生物化学),Prolume(发光/荧光分子和硬件创新专家),黑森林工程(光学器件工程),Avidity正在开发用于检测和鉴定的蛋白质和DNA微阵列生物芯片和生物传感器的疾病病原体和复合高通量筛选(HTS)。

 

 

BirA酶(生物素连接酶)

货号:BirA500

品名:BirA biotin-protein ligase standard reaction kit(BirA生物素蛋白连接酶标准反应试剂盒)

 

生物素连接酶(Biotin Protein Ligase)用于催化生物素化反应,将生物素连接到特定的蛋白上。同时它也是生物素诱导抑制剂,常见类型包括大肠杆菌中的BirA。BirA已经被广泛应用到各类实验中,包括真核细胞实验。

 

BirA受体-多肽系统在生物素化多肽底物时,具有超高的特异性。BirA可以识别一段多肽序列(生物素受体标签BAT)。当融合BAT的蛋白和BirA共表达时,BAT序列可以被有效生物素化。被生物素化的蛋白质可以通过与之有高亲和力的抗生物素蛋白或者链霉亲和素进行一步纯化。

BirA催化的生物素化过程一般包含两个步骤:1. 将生物素和ATP反应生成biotinoyl-5‘-AMP, 此过程将活化的生物素被固定在BirA的活性位点上。2. 将活化的生物素通过反应偶联到BAT序列的特定赖氨酸残基上  。

 

 

一、BirA酶产品性质:

货号

BirA500

浓度

1.0mg/ml

来源:    

E. coli.

酶活性:

5000 Units/µg

Mol wt    

33.5kDa

规格

20ul

储存缓冲液

50mM 咪唑(pH 6.8), 50mM NaCl, 10% 甘油, 5mM (DTT)

纯度:

> 99%通过考马斯亮蓝染色

储存条件:  

 

于干冰中运送,到达后要立刻置于-80°C中。解冻后分装,近期使用可保存于4°C,长时间的使用需保存于在-80°C.

 

二、典型的BirA动力学活性测定

 

 

三、BirA酶的12%聚丙烯酰胺SDS-PAGE凝胶图谱*

 

https://www.avidity。。com/avitag/bira-500-bira-biotin-protein-ligase-standard-reaction-kit