5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

上海金畔生物科技有限公司提供5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 D10389
英文名称 X-GAL
中文名称 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
别    名 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside; 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside;   5-溴-4氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷; 5-溴-4-氯-3-吲哚 β-D-半乳糖苷; X-gal/BCIG;
保存条件 Store at -20℃.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 CAS号:7240-90-6
分子式:C14H15BrClNO6
分子量:408.63
MDL:MFCD00005666
级别:超纯
纯度:>99%
外观/性状:白色至浅黄色粉末
溶解性:溶于DMSO,溶解度可达20mg/mL。也溶于DMF。
敏感性:对光敏感,易吸潮
用途:X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。

配制储存液:

称取200mg X-Gal于15 mL 离心管,向其中加入10mL DMF,旋涡震荡使其充分溶解后,建议分装,-20℃避光保存,有效期可达6-12个月。

蓝白斑筛选:

1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液
1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右。
2)每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其终浓度达到1 mM);
3)加入适量抗生素;
4)混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于37℃过夜培养。

2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面
1)于无菌超净工作台制备平板(如LB 琼脂板); 2)取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均匀地涂布于准备好的平板上;
注:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。
3)37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min或更长)。接种细菌于37℃过夜培养。