Haematologic HCVA-0110说明书

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

Coagulation Factor Va

 

凝血因子Va

说明了因子Va在凝血酶原
酶组装中的参与和凝血酶原酶复合物的表达。由重(VaH)和轻(VaL)链组成的因子Va与带负电荷的磷脂膜结合并有效地用作膜结合因子Xa(Xa)的受体。酶复合物用于将酶原凝血酶原(II)转化为活性丝氨酸蛋白酶凝血酶(IIa),在蛋白水解事件中除去凝血酶原的片段1.2(F1.2)部分。

 

 

HCVA-0110 Human Factor Va

Size

50 µg

Formulation

50% (vol/vol) glycerol/5 mM CaCl2

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

BCVA-1110 Bovine Factor Va

 

Size

100 µg

Formulation

50% (vol/vol) glycerol/5 mM CaCl2

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

 

因子Va是丝氨酸蛋白酶因子Xa的辅因子,并且在钙离子存在下,它们共同组装在磷脂表面上以形成凝血酶原酶复合物(1)。凝血酶原酶复合物负责凝血酶原快速转化为凝血酶。因子Va由α-凝血酶在有限的蛋白水解作用下衍生自促辅因子,因子V. 因子V的凝血酶裂解从分子的中心部分释放出两个重度糖基化的活化肽,其没有辅因子功能。因子Va由NH2-末端衍生的重链(Mr = 94,000)和COOH-末端衍生的轻链(Mr = 74,000)组成,其在钙离子存在下保持缔合。辅因子结合磷脂(细胞膜)表面并有效地充当膜结合因子Xa的受体。凝血酶原酶复合物(因子Xa,因子Va,磷脂和钙)的*组装导致凝血酶原转化率相对于单独因子Xa观察到的速率增加300,000倍。因子Va和因子Xa之间的相互作用由因子Va的重链和轻链介导,而凝血酶原与因子Va的结合仅由重链介导。

通过用凝血酶活化纯化的因子V来制备因子Va,随后通过免疫亲和层析(2)纯化。该过程产生不含活化肽和凝血酶的辅因子制剂。纯化因子Va以50%甘油(体积/体积),5.0mM CaCl 2提供,并应储存在-20℃。通过SDS-PAGE分析测定纯度,并在因子Va凝固测定中测量活性。

 

凝胶

Novex 4-12%Bis-Tris

加载

人因子Va,每泳道1μg

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特别说明

因子V是一种非常不稳定的蛋白质。一些降解的碎片通常在制剂中是显着的

本土化

等离子和膜表面

行动方式

凝血酶原酶复合物中因子Xa的辅因子

分子量

168,000(基于亚基的组合分子量)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 17.4(3)

 

结构体

两个亚基,Mr 94,000(重链)和74,000(轻链)(4)

碳水化合物百分比

约8%(基于人因子Va的计算分子量)

 

参考

本土化

等离子和膜表面

行动方式

凝血酶原酶复合物中因子Xa的辅因子

分子量

168,000(基于亚基的组合分子量)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 17.4(3)

 

结构体

两个亚基,Mr 94,000(重链)和74,000(轻链)(4)

碳水化合物百分比

约8%(基于人因子Va的计算分子量)

 

出版物

  • Monteiro,R.,et al。,Biochem。J.(2005)387,871-877。(凝血酶原激活)
  • Reis,C.,et al。,Biochem。J.(2006)398,295-302(凝血酶原激活)

 

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