产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 产品价格 |
190-18661 | Super Clear Mount Super Clear Mount封片剂 |
10 mL |
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
荧光蛋白观察用、油浸物镜适用封片剂
Super Clear Mount封片剂
Super Clear Mount(RI:1.52)是将折射率(RI)调整到与浸油(RI:1.52)以及盖玻片(RI:1.52)折射率完全一致的产品。与传统封片剂相比,Super Clear Mount提高了深层部位的分辨率,可用于更高分辨率的分析。另外,用油镜观察时,即使在深部也可以维持稳定的亮度与分辨率(尤其是z分辨率),也可用于超分辨率的应用。
数据来源:国立研究开发法人理化学研究所 柯孟岑老师、今井猛老师(现九州大学医学研究院)
◆原理/性能表
图1. Super Clear Mount原理
Super Clear Mount |
|
封固后的硬化性 |
非硬化性*、可长期保存(最长1年) |
折射率 |
1.52 |
适用样品厚度 |
0~200 μm |
防止荧光蛋白褪色 |
+++** |
存储温度 |
室温 |
*Super Clear Mount虽为非硬化性,但与空气接触部分会硬化。因此,可以通过滴入过量的Super Clear Mount,用多余部分硬化盖玻片、样本和载玻片。
**与其他市售品比较,+++:最好。
◆特点(深层部位的高分辨率、高明亮度)
图2. 使用Super Clear Mount的深部高分辨率、高明亮度数据
(A)使用共聚焦显微镜(pinhole size,1 AU)与油浸物镜(100 ×:NA 1.40;WD 0.13 mm)进行荧光微球
(A)(diameter, 100 nm)PSF分析。
(B)lateral 以及 axial FWHM(分辨率)数据
(A)深层部位可维持高分辨率。
(C)使用罗丹明色素的共聚焦axial scans数据
(A)深层部位可维持高分辨率。
◆防止荧光蛋白褪色的效果
在广泛的频谱范围内发挥保持信号与防褪色效果
图3. 使用Super Clear Mount的荧光蛋白防褪色效果数据
(A)荧光蛋白EGFP光褪色曲线图
(A)HEK293细胞中的荧光蛋白表达后,分别使用Super Clear Mount、PBS、其他公司商品(荧光蛋白适用)封
(A)片。
(A)持续使用水银灯照射并检测荧光亮度变化。物镜为20× dry(NA 0.4)。将照射开始时的荧光亮度设为1。
(B)各荧光蛋白荧光亮度的稳定性。
◆使用超分辨率显微镜的应用实例
使用超分辨率显微镜,实现深部超分辨率成像
图4. 使用Super Clear Mount,并用超分辨率显微镜观察
传统的封片剂会使画面失真,但使用Super Clear Mount能在深部获得高分辨率图像。
(A)使用超分辨率显微镜观察细胞膜上的丝状伪足延伸
(A)在HEK293T细胞的细胞膜上表达EGFP后,使用核染料、线粒体染料进行观察
(A)通过超分辨显微镜获取细胞膜上的丝状伪足延伸。
(B)使用超分辨率显微镜观察果蝇大脑
(A)果蝇大脑延髓神经节的神经细胞:使用荧光蛋白(GFP)标记Mi1,使用超分辨率j观察
(A)(深度约为100 μm)。
(A)实现深层部分超分辨率成像。