Poly(A) Polymerase酶试剂盒Takara


Poly(A) Polymerase
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Takara 2181 Poly(A) Polymerase 20 U ¥1,031 Poly(A) Polymerase Poly(A) Polymerase Poly(A) Polymerase
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■ 制品内容
Poly (A) Polymerase (2 U/μl) 20 U
10X Poly (A) Polymerase Buffer 1 ml
10 mM DTT 1 ml
25 mM MnCl2 1 ml
0.1% BSA* 500 μl
100 mM ATP 8 μl
   
* BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
本酶催化在各种多聚核糖核酸的3′末端聚合A碱基的反应。反应中使酶达到高活性所需的盐浓度为300-400 mM NaCl。能以多种单链RNA作引物,双链RNA以及合成的多聚核苷酸、短的寡聚核苷酸等不宜作引物;DNA也不能作引物。本酶因聚合AMP碱基,故只能用ATP作底物,ADP、dATP均不能作为底物。另外,UTP、CTP的掺入不足ATP的5%,而GTP也不能作为底物进行聚合。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ ATP的掺入个数和时间的关系
以1 mM ATP作底物,15 U的Poly(A) Polymerase作用于84 μg RNA所得到的结果如下:
反应时间(分钟) 0 5 10 30 60
Poly(A)碱基数 0 10 20 40 75
 
■ 起源
Escherichia coli B
 
■ 活性定义
以ATP为底物,在37℃、pH7.9的条件下,10分钟内把1 nmol的AMP聚合到引物上所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
 
■ 用途
1. 在RNA上加上Poly (A) 尾。
2. RNA的3′末端标记。
 
 

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