EpiScope® Nucleosome Preparation Kit酶试剂盒Takara

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EpiScope® Nucleosome Preparation Kit
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Takara 5333 EpiScope® Nucleosome Preparation Kit 50 Rxns ￥3,004 EpiScope® Nucleosome Preparation Kit EpiScope® Nucleosome Preparation Kit EpiScope® Nucleosome Preparation Kit
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■ 制品内容 (50 次量)
Package 1
Micrococcal Nuclease (20 U/μl) 50 μl
Micrococcal Nuclease Buffer (10X) 1 ml
RNase A (20 mg/ml) 100 μl
0.5 M EDTA 100 μl
Proteinase K 200 μl
LINE-1 qPCR Primer (10 μM each)* 50 μl
   
Package 2
Cytoplasmic Lysis Buffer 25 ml×2
Protease Inhibitor Cocktail (100X) 550 μl
 
* 使用Real Time PCR进行相对定量解析时，作为校正基因组DNA量的参考来使用。因为是人基因组DNA检出用引物，不可用于其他物种的检测。
 
■ 制品说明
真核生物细胞的细胞核中存在的核小体 (nucleosome) 是染色质的基本构成单位，它是由组蛋白为核心和缠绕于组蛋白的基因组DNA共同组成的。目前我们已经知道基因组DNA上的核小体DNA是以一定的间隔存在的，它的存在位置与染色质构造及转录调控机制有着密切关系，因此在基因表达调控研究中的重要领域–表观遗传学研究中，核小体作为重要的研究对象之一。具有转录活性的基因其启动子区域中不存在核小体，一直处于转录起始时可与必要的转录因子结合的状态。一旦该区域的DNA发生甲基化，此部位就会形成核小体，转录因子不能与启动子区域结合使转录受到抑制。
本制品是从动物培养细胞中制备核小体的专用试剂盒。从制备的核小体提取DNA后，利用Real Time PCR及高速测序可以解析核小体在基因组上的位置。
本制品的操作流程如下：
1. 细胞的溶解与细胞核的离心沉降。
2. Micrococcal Nuclease切断未缠绕在组蛋白上的DNA。
3. Proteinase K处理去除组蛋白。
4. DNA的回收 (需要另备DNA纯化试剂盒，如Clontech Code No. 740609.10/.50/.250)
使用本制品回收的DNA为已形成核小体的基因组DNA区域，未缠绕于组蛋白上的基因组DNA已被Micrococcal Nuclease切断。
[注意] 本试剂盒不适用于经EpiScope ChIP Kit (anti-mouse IgG)(Code No.:5331) 等交联处理后细胞的染色质片段使用。
 
■ 保存
Package 1：-20℃
Package 2：4℃。
 
■ 注意事项
1. 酶类试剂使用前请轻微离心，然后置于冰上。
2. Protease Inhibitor Cocktail、Micrococcal Nuclease Buffer (10X) 和0.5 M EDTA使用前在室温下融解，混匀后离心，在室温下使用。使用后于各温度保存。
3. 室温下配制Micrococcal Nuclease反应液混合液，配制混合液时最后添加Micrococcal Nuclease。 (冰上配制会出现盐析，出现盐析时请于37℃融解。)