抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗体(Gly-pep1) anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)


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抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗体(Gly-pep1)                  anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗体(Gly-pep1)

anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)

 


产品编号

产品名称

包装

AG-25B-0034-C100

抗微管蛋白(甘氨酰化),

多克隆抗体(Gly-pep1)

anti-Tubulin   (glycylated), 

pAb (Gly-pep1)

100 ug

 

 

◆产品规格


产品详情

产品类别

多克隆抗体

来源/宿主

免疫原/抗原

窗体顶端

对应于人微管蛋白β-2A链的D431EQGEFE(G-COOH *)EEEG441-NH2(*从谷氨酸的γ-羧基分支的甘氨酸作为异肽键)的合成肽。 窗体底端

应用

Western Blot: (1:10,000)

免疫组化: (1:5,000)

免疫共沉淀: (1:200)

交叉反应

小鼠

特异性

该抗体识别单糖或双糖化微管蛋白。培养细胞中的甘氨酰酶(TTLL3和TTLL8)的活性主要导致α-和β-微管蛋白的修饰,但也导致其他尚未鉴定的蛋白质底物被抗体Gly-pep1检测到。在免疫荧光标记中,该抗体强烈标记甘氨酰化微管(Gadadhar等,2017)。

纯度

≥95% (SDS-PAGE)

纯化详情

表位亲和纯化

浓度

1mg/ml

规格

液体。在含有0.02%叠氮化钠的PBS中保存。

Accession   Number

Q13885

运输及储存

运输

蓝冰

短期存储

+4°C

长期存储

-20°C

储存建议

重新配制后,建议分装并储存于-20°C。

避免反复冻融。

使用/稳定性

收到产品后可在-20℃稳定保存至少6个月。

 

◆产品描述


  微管是在所有真核细胞中都能发现的关键细胞骨架元件。一般认为是通过“微管蛋白密码”调控机制来生成不同特性的微管,从而使微管能实现多种不同功能。标记微管的一种机制是通过各种各样的微管蛋白翻译后修饰(PTM)。其中一种修饰方式是甘氨酰化,通过将二级甘氨酸链(支链)添加到蛋白质的主肽链产生。这些支链的长度可以从一个到二十个以上的甘氨酸残基不等。甘氨酰化由来自微管蛋白酪氨酸连接酶样(TTLL)家族的酶TTLL3,TTLL8和TTLL10催化。尤其是TTLL3和TTLL8对于甘氨酰化起始是必需的,因为它们产生初始的甘氨酸链。
  Gly-pep1抗体是通过模拟β2-微管蛋白(TUBB2A)在E437位点上带有单甘氨酸链的多肽而制备的抗体。本抗体可以特异性地检测甘氨酰化的微管蛋白,以及在细胞以及组织中的其他未知的甘氨酰化底物。因微管的甘氨酰化主要在纤毛和鞭毛中发生,Gly-pep1还可以标记能动的纤毛以及原纤毛(Gadadhar等,2017)。

 


参考文献


  Tubulin glycylation controls primary cilia length: S. Gadadhar, et al.; J. Cell Biol. (Article in press) (2017)

 

实验数据

 

抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗体(Gly-pep1)                  anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)

 

  使用抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗体(Gly-pep1)(产品编号AG-25B-0034)进行蛋白质甘氨酰化的免疫印迹分析。实验方法:在标准条件下培养HEK-293T细胞,转染表达甘氨酰酶TTLL3和TTLL8的质粒,并在10%SDS-PAGE上进行电泳。使用小鼠睾丸的裂解液作为甘氨酰化微管蛋白的阳性对照。将蛋白转至NC膜并进行免疫印迹检测,以抗微管蛋白(甘氨酰化)多克隆抗体(Gly-pep1)(1:20,000)在含0.1%Tween-20的TBS(TBS-T)中进行洗涤,在含2.5%脱脂牛奶的TBS-T中进行抗体孵育。在未转染的HEK-293T细胞提取物中,即使在高度曝光下也检测不到微管蛋白。在TTLL3甘氨酰酶表达后,主要是β-微管蛋白被Gly-pep1检测出来,同时,TTLL8表达产生了Gly-pep1阳性的 α-微管蛋白以及其他尚未鉴定的底物。睾丸裂解液也含有不同甘氨酰化蛋白的异质混合物,包括α和β-微管蛋白。图片由巴黎居里研究所的Sudarshan Gadadhar和Carsten Janke提供。

 

抗微管蛋白(甘氨酰化),多克隆抗体(Gly-pep1)                  anti-Tubulin (glycylated), pAb (Gly-pep1)

 

 

  使用抗微管蛋白(甘氨酰化)多克隆抗体(Gly-pep1)(产品编号AG-25B-0034)对多纤毛室管膜细胞和带有初级纤毛的细胞进行免疫荧光染色。 实验方法:从新生野生型小鼠分离的放射状神经胶质细胞和血清饥饿诱导MDCK细胞系的纤毛发生。用微管稳定化方法固定细胞并用抗微管蛋白(甘氨酰化)多克隆抗体(Gly-pep1)(1:5,000;红色),抗α-微管蛋白(乙酰化)多克隆抗体(TEU318)(AG-20B -0068)(绿色)和DAPI(蓝色)染色。在纤毛上观察到Gly-pep1特异性染色。图片由巴黎居里研究所的Sudarshan Gadadhar和Carsten Janke提供。

 

◆相关产品


产品编号

产品名称

包装

AG-20B-0020B-C100

anti-Polyglutamylation   Modification,

 mAb (GT335) (Biotin)

聚麸胺修饰单抗   (GT335) (生物素标记)

100 ug

AG-20B-0020-C100

anti-Polyglutamylation Modification, 

mAb (GT335)

聚麸胺修饰单抗   (GT335)

100 ug

AG-27B-0005-C100

anti-alpha-Tubulin,   mAb (rec.)

 (F2C)

重组型alpha微管蛋白单抗(F2C)

100 ug

AG-27B-0005TD-C100

anti-alpha-Tubulin,   mAb (rec.)

 (F2C) (ATTO 488)

重组型alpha微管蛋白单抗(F2C)(ATTO   488)

100 ug

AG-27B-0009-C100

anti-Tubulin-GTP,   mAb (rec.) (MB11)

重组型微管蛋白-GTP单抗(MB11)

100 ug

AG-20B-0068-C100

anti-alpha-Tubulin   (acetylated), mAb (TEU318)

α-微管蛋白 (乙酰化), 单克隆抗体(TEU318)

100 ug

AG-27B-0008-C100

anti-beta-Tubulin,   mAb (rec.) (S11B)

重组型beta微管蛋白单抗(S11B)

100 ug

 

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