Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads 亲和蛋白磁珠最终版


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
209-18261 Tamavidin®2, recombinant
Tamavidin®2, 重组型
1mg 免疫化学用
205-18263 Tamavidin®2, recombinant
Tamavidin®2, 重组型
5mg 免疫化学用
203-18264 Tamavidin®2, recombinant
Tamavidin®2, 重组型
25mg 免疫化学用
203-19401 Tamavidin®2-REV, recombinant
Tamavidin®2-可逆性,重组型
1mg 免疫化学用
209-19403 Tamavidin®2-REV, recombinant
Tamavidin®2-可逆性,重组型
5mg 免疫化学用
202-19351 Tamavidin®2-LPI, recombinant
Tamavidin®2-小分子量非特异结合,重组型
1mg 免疫化学用
208-19353 Tamavidin®2-LPI, recombinantTamavidin®2-小分子量非特异结合,重组型 5mg 免疫化学用
209-19361 Tamavidin®2-HOT, recombinant
Tamavidin®2-耐热性,重组型
1mg 免疫化学用
205-19363 Tamavidin®2-HOT, recombinantTamavidin®2-耐热性,重组型 5mg 免疫化学用
136-18341 MagCapture™ Tamavidin®2-REV
新型抗亲和蛋白•磁珠纯化试剂
20mL 基因研究用
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  • 参考文献

Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads                  亲和蛋白磁珠最终版亲和蛋白磁珠最终版

Tamavidin®2-REV Magnetic Beads



Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads                  亲和蛋白磁珠最终版

<Tamavidin®2-REV ~和生物素可逆性结合>

  Tamavidin®2-REV是新亲和蛋白[Tamavidin®2]的变体。由于生物素的结合力降低,可形成可逆的生物素结合复合物。因此,通过添加过量生物素,可以竞争性洗脱生物素分子。

  (之前的亲和蛋白/链亲和素与生物素的结合力非常牢固且不可逆。)


◆MagCapture™ Tamavidin®2-REV 概要

Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads                  亲和蛋白磁珠最终版

  MagCapture™ Tamavidin®2-REV试剂组成:磁珠悬浮液,TBS缓冲液(pH7.4),0.05w/v%叠氮化钠,50w/v%甘油。



◆MagCapture™ Tamavidin®2-REV使用案例


  生物素化DYKDDDDK-BAP回收性能验证。

Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads                  亲和蛋白磁珠最终版

  竞争洗脱的生物素溶液组成:2mmol/L 生物素,PBS溶液。


添加生物素化DYKDDDDK-BAP  10ng至细胞裂解液(相当于1*106细胞数)与原产品Streptavidin磁珠比较添加回收性能。

MagCapture™ Tamavidin®2-REV与原产品比较,低背景,能够回收到目生物素化DYKDDDDK-BAP。

生物素抗体免疫沉降

Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads                  亲和蛋白磁珠最终版

  采用生物素化Anti-hAgo2 Mab,从K562细胞回收内源性人Ago2蛋白质。

  与原产品Streptavidin磁珠相比,MagCapture™ Tamavidin®2-REV是因其低背景,能够回收到内源性人Ago2蛋白质。


◆RNA Pull-down检测

  应用(HOTAIR RNA)

  通过RNA Pull-down检测比较原产品链霉亲和素磁珠和MagCapture™ Tamavidin®2-REV的性能。

  RNA Pull-dow检测后的生物素可竞争性洗脱。(数据未公布)。

Tamavidin® 2-REV Magnetic Beads                  亲和蛋白磁珠最终版

A

用生物素标记HOTAIR RNA的有义链和反义链进行RNAPull-down检测,通过SDS样品缓冲液洗脱,纯化的蛋白质样本通过银染色可检测出来。各RNA探针的反应样本均采用的是K562(5×106细胞数)的总细胞裂解物。

B

利用RNAPull-down实验获得的样本进行免疫印迹实验。一抗是抗Ezh2抗体(D2C9)以及LSD1抗体(C69G12)。

MagCapture™ Tamavidin®2-REV与原产品相比,可高效率且低背景回收RNA结合蛋白。

Tamavidin®2 系列 产品概要

Magnetic Beads

  本产品是将新规格抗生物素蛋白样蛋白的Tamavidin®2-REV固相化在磁珠上。

  Tamavidin®2-REV是新规格的抗生物素蛋白样蛋白。因通过氨基酸修饰具有可逆的生物素结合性能,在结合生物素分子后,通过添加过量的生物素在温和洗脱条件下可回收靶分子。

Tamavidin®2重组体

产品名称

等电点(pl)※1

耐热性※2

有机溶剂耐性

生物素结合速度系数(ka(M-1S-1))

生物素解离速度系数(kd(S-1))

分子量(四聚物)

Tamavidin®2

7.4

Tm=85℃

+

(1.0±0.5)×106

检测极限值以下※4

約60kDa

Tamavidin®2-REV

8

Tm=75℃

(1.3±0.5)×106

(1.5±0.4)×10-5

約60kDa

Tamavidin®2-LPI

6

Tm=65℃

(1.2±0.5)×106

检测极限值以下

約60kDa

Tamavidin®

2-HOT

7.23

高耐熱性

高耐性※3

(3.0±1.7)×105

检测极限值以下

約60kDa

※1

等电点:仅为Tamavidin®2-LPI的实测值。其他产品是通过氨基酸序列计算出来的数值。

※2

耐热性(TM值):生物素结合活性加热20分钟可达到加热前的50%。关于Tamavidin®2-HOT,因为在99.9℃加热30分钟结合活性保持在90%以上,所以算不出数值。

※3

高耐性:40-50%DMSO中

※4

检测极限值:5×10-6(kd(S-1))

欲了解相关资料请点击:Tamavidin®2-REV Magnetic Beads技术研讨会

【参考文献】

<Tamavidin®2>
[1] Takakura, Y. et al., "Tamavidins – novel avidin-like biotin-binding proteins from the Tamogitake mushroom.", FEBS Journal, 276, 1383(2009).
[2] Takakura, Y. et al., "Tamavidin, a versatile affinity tag for protein purification and immobilization.",J. Biotechnol., 145, 317(2010).
<Tamavidin®2-REV>
[3] Takakura, Y. et al., "Tamavidin2-REV: An engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19(2013).
<Tamavidin®2-LPI>
[4] Takakura, Y.et al., "Engineering of novel tamavidin 2 muteins with lowered isoelectric points and lowered non-specific binding properties.", J. Biosci. Bioeng.,114(5), 485(2012).
<Tamavidin®2-HOT>
[5] Takakura, Y. et al., "Tamavidin-HOT, a highly thermostable biotin-binding protein.", J. Biotechnol., 169, 1(2014).

[6] Ukekawa, R. et al., "A useful new tool for isolation of long non-coding RNA-binding proteins.",Medical Science Digest, 40(7), 355(2014).

[7] Takakura, Y. et al.: "Tamavidin2-REV : an engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.", J. Biotechnol., 164(1), 19-25(2013).