StemSure® hPSC冻存液, AF 用于人iPS细胞冻存


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
197-17831 StemSure® hPSC Freezing Medium, AF
StemSure® hPSC冻存液,AF
100mL 细胞培养用
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用于人iPS细胞冻存StemSure®  hPSC冻存液, AF                  用于人iPS细胞冻存

StemSure® hPSC冻存液,AF

 


StemSure® hPSC冻存液,AF是无动物源成分的人iPS细胞用冻存液。本品含DMSO。

 


◆特点


● 能以高细胞存活率冻存人iPS细胞

● 不含动物源成分

● 可以以缓慢冻结的方式进行冻存

● 可用于无饲养层培养的细胞

● 无需进行繁杂的试剂配制

● 无需程序降温


 StemSure®  hPSC冻存液, AF                  用于人iPS细胞冻存

 

 

◆人iPS细胞冻存步骤


 1.在除去人iPS细胞培养皿中的培养液,用D-PBS(-)清洗后,用Accutase等分散细胞

 2.添加含有10 µmol/L Y-27632的人iPS细胞用培养基(hPSC培养基(+ROCKi)),用移液器吹散成单细胞

 3.将吹打分散后的细胞悬浮液移至样本管中,离心(1,000rpm,3分钟,室温)后,除去上清液

 4.添加hPSC培养基(+ROCKi),用移液器悬浮

 5.计算细胞数,将样本管离心(1,000rpm,3分钟,室温)后,除去上清液

 6.利用本产品使细胞悬浮成2×106cells/mL,并以500 µL/管进行分装

 7.在-80°C下冷冻后,在-150°C或者-80°的条件下保存(长期保存建议保存在-150°C)

 1.添加hPSC培养基(+ROCKi)到冻存瓶中,复苏冷冻细胞
(使用温水浴复苏冷冻细胞的情况下,只需要半溶解)

 2.离心(室温下,1,000rpm,3分钟)后,除去上清液,添加hPSC培养基(+ROCKi),使细胞悬浮

 3.计算细胞数,以2×105cells/6cm的密度在培养皿中铺板



◆人iPS细胞201B7株的冻存


确认细胞存活率和细胞增殖率

将培养中的人iPS细胞201B7株分散成单细胞后,重悬于StemSure® hPSC冻存液,AF中,在-80°C下冻存2~4天。

确认冷冻复苏后的细胞存活率和细胞增殖率。反复冷冻复苏5次后,确认细胞、细胞集落的形态和各种未分化标记(Oct3/4、Nanog、BC2LCN)的表达。

StemSure®  hPSC冻存液, AF                  用于人iPS细胞冻存

确认细胞集落的形态

StemSure®  hPSC冻存液, AF                  用于人iPS细胞冻存

确认细胞存活率和细胞增殖率

StemSure®  hPSC冻存液, AF                  用于人iPS细胞冻存

结果表明,用StemSure® hPSC冻存液,AF冻存的人iPS细胞显示出高细胞存活率和细胞增殖率。

另外还确认了各种未分化标记的表达。

 


◆人iPS细胞冻存步骤


使用用StemSure® hPSC冻存液,AF冷冻复苏5次后的iPS细胞201B7株,形成胚叶体,βⅢ-Tubulin,α-SMA,AFP的表达确认其分化成了三胚叶。

(胚叶体形成,三胚叶分化诱导时的培养基组成)

Stemsure D-MEM+SSR+2mol/L L-Glutamine+10mmol/L2-Mercaptoethanol +1×Non-essential Amino Acids Solution

StemSure®  hPSC冻存液, AF                  用于人iPS细胞冻存



测试项目:外观,应用试验(iPS细胞201B7株),无菌试验,内毒素,支原体测试

可用于ES干细胞的冻存液,请点击:StemSure细胞冻存液

通用动物细胞冻存液,请点击:CultureSure无血清细胞冻存液