孔板涂层溶液Easy iMatrix-511 Easy iMatrix-511


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孔板涂层溶液Easy iMatrix-511                  Easy iMatrix-511干细胞培养的基础材料 iMatrix系列

无需稀释可直接使用的孔板涂层溶液

Easy iMatrix-511


孔板涂层溶液Easy iMatrix-511                  Easy iMatrix-511


  Easy iMatrix-511是可以直接应用于培养孔板涂层的稀释溶液,有iMatrix-511和iMatrix-511 silk两种类型的稀释溶液。

  本品1支(100mL)可用于大约11块6孔板。

  培养孔板涂层后iMatrix-511及iMatrix-511 silk的使用方法相同。


产品名称

Easy iMatrix-511

(iMatrix-511稀释型)

Easy iMatrix-511 silk

(iMatrix-511 silk 稀释型)

产品编号

380-13041

387-13051

转基因蛋白质

人层粘连蛋白511E8片段

转基因蛋白表达系统

转基因CHO-S细胞

转基因蚕表达系统

产品形态

稀释溶液

容量

100mL(可包被约11块6孔板)

储存条件

2-15℃

备注

含有重组HSA

 


◆使用方法


【使用方法:以6 well plate (9.6 cm2 / well) 为例】

  1. 每孔中添加该产品1.5mL(0.25μg/cm2)。

  2. iMatrix-511或iMatrix-511 silk可在以下三种条件下进行涂层处理:①37℃ 1小时处理、②室温 3小时处理、③4℃ 过夜处理。

  3. 涂层处理完成后,去掉Easy iMatrix-511溶液,在孔板未干燥状态下,迅速接种细胞。

    ※避免涂层处理后的培养器材干燥,以免影响培养效果。   


◆产品列表


产品编号

产品名称

提纯原料

规格

380-13041

Easy iMatrix-511

层粘连蛋白511

iMatrix-511

100mL

387-13051

Easy iMatrix-511 Silk

层粘连蛋白511 蚕来源

iMatrix-511 Silk

100mL

    

※本产品仅供实验研究用。



◆相关产品


产品编号

产品名称

容量

385-07361

iMatrix-511溶液 (0.5mg/mL PBS)

重组层粘连蛋白511-E8片段,溶液(0.5mg/mL)

175µg×2(350µL×2)

381-07363

175µg×6(350µL×6)

 

Easy iMatrix-511, Easy iMatrix-511silk


Q1. 产品是以什么样的状态销售的?

A1. 产品是以液态销售的。

一瓶里密封装有1.6 μg/mL浓度的100 mL细胞培养基质(层粘连蛋白511-E8片段)。

 


Q2. 产品的存储条件和有效期是什么?

A2. 产品的储存条件为,冷藏保存在2-15°C。(推荐4°C)

产品的有效期,请参考下表。

产品

保质期

Easy iMatrix-511

Lot.001为生产后6个月内

Easy iMatrix-511silk

Lot.002以后为生产后一年内

※    具体的有效期详见考产品外包装。

 


Q3. 可以冷冻保存吗?

A3. 不可以冷冻保存。

 


Q4. 培养hES/hiPS细胞时使用什么培养基最好?

A4. 宫崎等的论文(Nature communications, 3(1236), 1-10, 2012)、(Scientific Reports, 7, 41165, 2017)中,使用了以下的培养基。

・mTeSR1,TeSR2,TeSR-E8 (STEMCELL Technologies)
・StemPro hESC SFM (Thermo Fisher Scientific)
・StemFitAK03 (Ajinomoto)

中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 1-7, 2014)中使用了以下的培养基。

・StemFit (Ajinomoto)

文献中使用的培养基都出现了良好的结果。

 


Q5. 请教我培养iPS细胞时最佳的使用量。

A5. 6孔板的一个孔中(9.6cm2)使用1.5 mL本产品时,iMatrix-511的浓度为0.25 μg/cm2

 


Q6. 培养iPS细胞时需要Rock Inhibitor(Y-27632)吗?

A6. 在中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)中,介绍了只有在传代时添加Rock Inhibitor,更换培养基的时候不使用的方法。

 


Q7. 培养iPS细胞时可以单细胞传代吗。

A7. 可以。

※使用iMatrix-511时,ES/iPS细胞的扩增培养步骤,传代操作,请参考以下的链接。

(扩增培养步骤 )

(传代操作的视频)

也可以参考中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)。

 


Q8. 传代时使用什么细胞分离液?

A8. 请使用胰蛋白酶。

※使用iMatrix-511时,ES/iPS细胞的扩增培养步骤,传代操作,请参考以下的链接。

(扩增培养步骤)

(传代操作的视频)

也可以参考中川等的论文(Scientific Reports, 4(3594), 2014)。

 


Q9. 可以使用小鼠的iPS细胞吗?

A9. 由于没有小鼠iPS细胞的培养数据,所以无法回答。

 


Q10. 这个产品与基质胶有什么不同?

A10. 基质胶含有小鼠EHS肉瘤来源的层粘连蛋白-111。另外还含有层粘连蛋白以外的分子。

iMatrix-511是将在CHO-S细胞中表达的层粘连蛋白511-E8片段高度纯化后的重组蛋白。

iMatrix-511silk是从蚕结的茧中高纯度纯化层粘连蛋白511-E8片段的重组蛋白。

已知iPS细胞是通过细胞膜受体(特别是α6β1整联蛋白)粘附于层粘连蛋白-511。

已知α6β1整联蛋白对层粘连蛋白-511具有高粘附活性。这使得用iMatrix-511 / iMatrix-511silk可以使iPS细胞在单细胞状态下传代。

在宫崎等的论文中(Nature communications, 3(1236), 1-10, 201),5次传代后(30天后)的细胞数扩增效率约为基质胶的200倍。