产品名称：免疫细胞无血清培养基 用于CIK细胞培养 1000mL/瓶
产品货号：NC0101
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 用途与描述 】
免疫细胞无血清培养基，可培养新鲜采集的外周血样本，也可培养浓缩白细胞样本以及冻存的单个核细胞。
可用于脐带血样本的培养。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 规格与保存 】
产品名称
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产品货号
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数量与规格
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CIK培养套装（外周血+2L体系）
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NC0101 + AN0101.2
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1000mL*2+2L试剂盒
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CIK培养套装（外周血+3L体系）
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NC0101 + AN0101.3
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1000mL*3+3L试剂盒
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CIK培养套装（脐带血+2L体系）
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NC0101 + AN0104.2
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1000mL*2+2L试剂盒
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CIK培养套装（脐带血+3L体系）
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NC0101 + AN0104.3
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1000mL*3+3L试剂盒
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2L培养体系免疫细胞无血清培养基套装：适用于50mL外周血的样本量，使用2L培养基。
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产品名称
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描述
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规格
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保存条件
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保存期限
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免疫细胞无血清培养基(CIK)
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免疫细胞体外培养
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1000mL/瓶*2
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2-8℃保存
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12个月
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CIK细胞诱导因子试剂盒
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YC001起始培养时添加
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1支
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-20℃保存
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YC002接种24h后添加
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1支
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YC003接种24h后添加
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1支
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YC004接种24h后添加
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1支
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YC005添加至培养基中使用，1支/L
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2支
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3L培养体系免疫细胞无血清培养基套装：适用于100mL外周血的样本量，使用3L培养基。
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产品名称
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描述
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规格
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保存条件
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保存期限
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免疫细胞无血清培养基(CIK)
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免疫细胞体外培养
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1000mL/瓶*3
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2-8℃保存
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12个月
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CIK细胞诱导因子试剂盒
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YC001起始培养时添加
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1支
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-20℃保存
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YC002接种24h后添加
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1支
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YC003接种24h后添加
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1支
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YC004接种24h后添加
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1支
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YC005添加至培养基中使用，1支/L
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3支
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【免疫细胞无血清培养基(CIK) 使用方法】
1、采集与分离外周血
采集外周血，Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。
2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时，绷胞计数。按细胞密度2×106cell/mL接种至对应体积的培养液中。
添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) 1d时(24小时)，添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。
将YC005添加至未经使用的培养基中，待用。
3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积10%比例的自体血浆。补液比例大致在1：2左右（原有培养液体积：新加培养液体积）
2) 5d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1：3左右。
3) 7d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(06-08）x106cell/mL。补液比例大致在1：2左右。
4) 9d时，将剩余培养液全部加入。
4、收获细胞
培养周期结束后，依据细胞量收获细胞。
【供参考的补液程序范围】
2L培养体系补液体积示意表：50mL外周血，接种密度2.0×106cell/mL。
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天数
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操作方式
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原有培养液
体积/mL
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新加培养液
体积/mL
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培养液
总体积/mL
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血浆添加
/mL
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因子添加
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备注
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0d
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接种
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0
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25
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25
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2.5
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YC001
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T75瓶
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1d
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诱导
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YC002
YC003/YC004
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3d
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补液
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25
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50
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75
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5
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换瓶
T175瓶
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5d
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补液
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75
|
225
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300
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转培养袋，
平分两袋
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7d
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补液
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300
|
700
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1000
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每袋补350mL
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9d
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补液
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1000
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1000
|
2000
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每袋补500mL
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备注：
1)补液后建议密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与建议密度区间有冲突的话，请以建议密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于50mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。
3L培养体系补液体积示意表：100mL外周血，接种密度2.0×106cell/mL。
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天数
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操作方式
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原有培养液
体积/mL
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新加培养液
体积/mL
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培养液
总体积/mL
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血浆添加
/mL
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因子添加
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备注
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0d
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接种
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0
|
50
|
50
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5
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YC001
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T175瓶
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1d
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诱导
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|
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YC002
YC003/YC004
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3d
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补液
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50
|
100
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150
|
10
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|
|
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5d
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补液
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150
|
450
|
600
|
|
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转培养袋，
平分两袋
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7d
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补液
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600
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1400
|
2000
|
|
|
每袋补700mL
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9d
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补液
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2000
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1000
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3000
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|
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每袋补500mL
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备注：
1)补液后建议密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与建议密度区问有冲突的话，请以建议密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于100mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 产品性能之外周血样本】
1. 细胞总数：125亿，折合62.5亿/L。
2、CD3+CD56+阳性率在25%-55%
3. 细胞支持密度更高。
培养14天后，细胞密度可至5.7×106cell/mL。 培养15天后，细胞密度可至6.2×106cell/mL。
4. 培养后期补液结束后，细胞维持能力更强。
最后一次补液（9d），持续至17天，细胞数量一直维持增长，未见明显下降。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 产品性能之脐带血样本】
50mL脐带血
细胞生长曲线
CIK细胞阳性率
