肝损伤肝脏&肾脏疾病-肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)-疾病研究-wako富士胶片和光

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主要用途 肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤    

肝损伤肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)
K18 角蛋白18(也为CK-18),是目前报道的肝损伤的4个生物标志物之一,并且被FDA认为是Z有前途的生物标志物之一。在检测和预测药物性肝损伤(DILI)的结果时需要敏感性和特异性更好的生物标记物,而K18可满足其需要。通过检测人Keratin 18(角蛋白18)确定细胞死亡的模式(凋亡或者坏死)。

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细胞死亡M65® ELISA试剂盒肝损伤肝脏&肾脏疾病-肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)-疾病研究-wako富士胶片和光

M65® ELISA

◆原理

M65® ELISA检测来自死亡细胞释放的可溶性角蛋白18(K18),可以整体评估细胞的死亡情况,判断是由于细胞凋亡还是细胞坏死引起的细胞死亡。M65® ELISA zui初是为了和M30 Apoptosense® ELISA配套使用而设计研发的,后者特异性检测细胞凋亡。两者配套使用,可定量检测总的细胞死亡、细胞凋亡和细胞坏死。

由于M30 Apoptosense® ELISA 和M65® ELISA 都是用同一标准进行校对的,所以可以评估细胞死亡中细胞凋亡占的比例。

M65® ELISA可用于检测人血清,并且带有CE标记(可用于体外诊断)

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◆优点?特色

● 只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况

● 与M30 Apoptosense® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和细胞死亡。

● 检测更稳定,特异性更高。

● 夹心法ELISA检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用

● 肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。

● 肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。

● 毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

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◆案例?应用

体内细胞凋亡或者坏死引起肿瘤细胞死亡。细胞死亡的模式取决于细胞毒素刺激的类型和肿瘤的类型。细胞内ATP产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死 (Leist et al., 1997)。细胞坏死期间,未经caspase水解的细胞内蛋白将会释放到细胞外。

角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性K18池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内K18会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由于细胞凋亡和细胞坏死导致) (Kramer et al., 2004).

K18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解, caspase-cleaved片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18 (ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(不同 “M30:M65 比”) (Kramer et al., 2004).

M65 EpiDeath® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据同一标准校对,可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有K18的水平是升高的,所以M30:M65 比值较低。

         体内或体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死)。与M30 Apoptosense® ELISA kit 联用可以检测上皮细胞凋亡在整个细胞死亡中所占的比例。

产品信息 肝损伤

M65®ELISA kit (CE-Mark) 体内,体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死) 。

特异性

样品类型

含有从死亡细胞中释放的CK18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin plasma)

灵敏度

11 U/I, Standard A(0 U/L)+2 S.D.

范围

125-2,000 U/L

检测目标物

完整的CK18和可溶性caspase酶解的CK18(ccCK18/CK18F/CK18Asp396-NE/M30)

特点 可进行定量检测;预铺ELISA 板(可拆卸)、即用试剂,操作方便;可用于自动化
稀释线性

用M65 Standard A 稀释,平均值是126%(范围116-139%);用血清稀释,平均值是120%(范围101-133%)

M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA的区别,请参考相关资料。

 更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
10020 M65 ®  ELISA
细胞死亡M65 ®  ELISA试剂盒
96 wells    

 

细胞死亡M65 EpiDeath® ELISA试剂盒肝损伤肝脏&肾脏疾病-肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)-疾病研究-wako富士胶片和光

M65 EpiDeath® ELISA

◆原理

 

 

      M65 EpiDeath® ELISA检测新一代生物标记物角蛋白18。

 

      M65 EpiDeath® ELISA 检测新一代的生物标记物角蛋白18。M65 EpiDeath® ELISA检测细胞培养上清,血清和血浆样品中可溶性的角蛋白18。 K18 的含量反应了所有上皮细胞的死亡情况,不管是由于凋亡还是坏死引起的死亡都可以检测到。

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◆优点?特色

●    只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况

●    检测更稳定,特异性更高。

●    夹心法ELISA检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用

●    肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。

●    肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。

●    毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

细胞凋亡或者坏死引起细胞死亡。细胞死亡的模式取决于刺激的类型 (比如:细胞毒素和化疗后的肿瘤,或者肝脏损伤)和组织类型(比如:肿瘤)。M30 Apoptosense ELISA and 和M65 EpiDeath ELISA配套使用不仅定量检测细胞死亡的数量,而且确定细胞死亡的模式。(凋亡或者坏死)(样品包括血清,血浆和细胞培养上清)

肿瘤中使用的细胞毒素会尽量克服细胞凋亡过程中的紊乱状态,刺激细胞发生凋亡。不同的肿瘤细胞和细胞毒素也会引起细胞坏死。细胞内ATP产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死(Leist et al., 1997).

 

肝脏损伤可能会引起肝细胞的死亡– 凋亡和坏死均可导致。有报道称细胞死亡模式的确定可用于不同肝脏疾病的临床诊断,预判和评估治疗效果(Volkmann et al., 2006)。角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性K18池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内K18会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由细胞凋亡和细胞坏死引起) (Kramer et al., 2004)。K18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解, caspase-cleaved片段释放到细胞外。因此细胞外的caspase-cleaved K18 (ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(Kramer et al., 2004).

 

M65 EpiDeath® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002; Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据统一标准校对过,可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有K18的水平是升高的,所以M30:M65 比值较低

        M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA的区别,请参考相关资料。

 

M65 EpiDeath®ELISA 是 M65®ELISA 的升级版,用于患者血清/ 血浆或细胞培养样品中总CK18 的测定。

特异性

样品类型

人血清或血浆、人细胞系的培养上清液或裂解液

灵敏度

25 U/L

范围

0–5,000 U/L

检测目标物

可溶性CK18

特点

可进行定量检测;试剂盒包含两个阳性对照;预铺ELISA   板,即用试剂,操作方便;可用于自动化

稀释线性

用M65 EpiDeath StandardA   稀释,平均值是95%(范围88-101%);用血清稀释,平均值是93%(范

围82-101%)

更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
10040 M65 EpiDeath ®  ELISA
细胞死亡M65 EpiDeath ®  ELISA试剂盒
96 wells    

 

M30 CytoDeath™ 上皮细胞凋亡ELISA试剂盒肝损伤肝脏&肾脏疾病-肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)-疾病研究-wako富士胶片和光

M30 CytoDeath™ ELISA

◆原理

 

      运用细胞培养物检测细胞凋亡。

 

      M30 CytoDeath™ ELISA可用于细胞培养物的检测。可进行体外实验。

 

      M30 CytoDeath™ ELISA可用于细胞凋亡诱导药物鉴定,包括时间进程动力学建立,剂量反应关系。也可用于大规模鉴定诱导细胞凋亡的siRNA。该试剂盒可用于定量检测上皮细胞形成的多细胞球样体和器官培养体系的细胞凋亡(见 Herrmann et al., J Biomolecular Screening 13, 1, 2008)。

 

      M30 CytoDeath™ ELISA 采用M30抗体(检测K18上Asp396 caspase-cleavage位点)和抗体 M6。该抗体组合不同于M30 Apoptosense® ELISA中的抗体,M30 CytoDeath™ ELISA 不能用于血清或者血浆。

 

 

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◆案例?应用

在体外实验中定量检测上皮细胞的凋亡情况

用3D-细胞培养上清,人类器官(比如肝脏)、多细胞球样体(比如肿瘤干细胞)或组织(比如活体组织)培养进行毒理学研究;

可用于高通量筛选和鉴定促凋亡药物。

定量检测多细胞球样体

多细胞肿瘤球体是肿瘤3D微环境模型。作为抗癌药物的研究对象,球体优于单层细胞。

PEVIVA与Karolinska研究所合作研发了用于多细胞球体药物筛选的试剂盒。M30CytoDeath™ELISA给研究药物渗透和诱导细胞死亡的研究者提供了强有力的工具。

◆产品信息

M30 CytoDeathTM  ELISA Kit    

特异性

人,猴子,牛

样品类型

表达CK18的凋亡细胞和凋亡组织的细胞上清液和裂解液

灵敏度

60U/L,Standard Z (0U/L)+   3 S.D.

范围

250-3,000   U/L

检测目标物

可溶性caspase酶解的CK18(ccCK18/CK       18F/CK18Asp396-NE/M30)

特点

检测范围广;样品制备容易;冷冻的细胞裂解液也可以进行检测;可用于自动化操作

稀释线性 用细胞培养基稀释,范围在80%-120%。

 更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
10900 M30 CytoDeath™ ELISA
M30 CytoDeath™ 上皮细胞凋亡ELISA试剂盒
96 wells    

 

M30 CytoDEATH™抗体肝损伤肝脏&肾脏疾病-肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)-疾病研究-wako富士胶片和光

M30 CytoDEATH™ antibodies

◆原理

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细胞凋亡过程中很多内源性蛋白发生水解。介导这些水解的酶主要是caspase。其中caspase的主要底物是上皮细胞表达的角蛋白18(K18,Cytokeratin 18 或者CK18) (Caulin et al., 1997)。

M30 CytoDEATH™抗体识别经caspase催化水解角蛋白18后在角蛋白Asp396处形成的新表位(K18Asp396-NE, M30 新表位) (Leers et al., 1999). M30 CytoDEATH™不结合正常细胞来源的天然,非修饰的K18。M30 CytoDEATH™可检测上皮细胞和上皮细胞来源的组织部分凋亡。

M30 CytoDEATH™ 抗体可用于免疫组化实验(福尔马林固定、石蜡包埋的切片和冰冻切片),免疫细胞组化和流式。M30 CytoDEATH™的阳性对照是凋亡细胞的胞质。

◆案例?应用

 PEVIVA M30 CytoDEATH™ 抗体实验结果

M30 CytoDEATH™ unlabeled

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Figure – 福尔马林固定,石蜡包埋的人结肠癌组织样品检测细胞凋亡,胞质部分用PEVIVA 的M30 CytoDEATH™ 染色caspase-cleaved角蛋白18(ccK18)。二抗用抗小鼠IgG(生物素标记),亲和素-POD,AEC作为底物。苏木精复染。

图片由Dr. Marius Nap, Heerlen, the Netherlands提供。

PEVIVA的 M30 CytoDEATH™ 生物素标记抗体

M30 CytoDEATH™ Biotin mAb

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Figure 福尔马林固定,石蜡包埋的人结肠癌组织样品检测细胞凋亡,胞质部分用PEVIVA 的M30 CytoDEATH™ 染色caspase-cleaved角蛋白18(ccK18)。二抗用抗小鼠IgG(生物素标记),亲和素-POD,AEC作为底物。苏木精复染。

图片由Dr. Marius Nap, Heerlen, the Netherlands提供。

PEVIVA M30 CytoDEATH™ 荧光素标记抗体

M30 CytoDEATH™ Fluorescein mAb

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Figure – Hela细胞用CHX和TRAIL处理后显示长久和很强的caspase活性,用PEVIVA的M30 CytoDEATH™ 荧光素抗体检测(A)caspase-cleaved K18的积累,与单独用非毒性低浓度CHX处理的样品对比(B)。

更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
10700 M30 CytoDEATH™ unlabeled 200 tests    
10750 M30 CytoDEATH™ Biotin mAb 200 tests    
10800 M30 CytoDEATH™ Fluorescein mAb 200 tests    
10830 M30 CytoDEATH™ Orange mAb 200 tests    

 

细胞凋亡M30 Apoptosense®ELISA试剂盒肝损伤肝脏&肾脏疾病-肝脏&肾脏疾病PEVIVA肝损伤-细胞凋亡与坏死产品系列(总览)-疾病研究-wako富士胶片和光

M30 Apoptosense® ELISA

◆原理

 

M30 Apoptosense® ELISA是PEVIVAzui畅销的产品。可用于定量检测表达角蛋白18(K18)细胞(人)的凋亡情况。检测结果可信度高,检测结果重复性好。特异性检测可信度高是因为M30 Apoptosense® ELISA 只单独检测可溶性caspase-cleaved 角蛋白18(细胞凋亡产物)。

该产品广泛运用于肝脏疾病,肿瘤,毒理学等研究领域。

M30 Apoptosense® ELISA可用于检测人血清,并且带有CE标记(可用于体外诊断)。所有试剂都是即用型的。

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◆优点?特色

特异性定量检测表达角蛋白18细胞的细胞凋亡包括肝细胞,乳腺癌、肺癌、前列腺癌、结肠癌等上皮细胞来源的肿瘤细胞。

●  可用于早期凋亡研究,比常规的Annexin V检测灵敏度高。可检测血清、血浆和细胞培养上清的样品。常规检测细胞凋亡,需要制备细胞裂解液,取材不方便。

●   可检测多种caspase介导的细胞凋亡(比如caspase-3,-7,-9)

●   夹心ELISA法进行检测,96孔板,板子可拆卸。试剂即拆即用。

●   与M65® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和总细胞死亡。

●   肝脏疾病:定量检测患肝脏疾病病人的肝细胞凋亡情况,可预测患肝脏疾病的可能性。

●   肿瘤:监测上皮细胞肿瘤患者化疗诱导肿瘤细胞凋亡的情况。

●  毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

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M30 Apoptosense® 是基于M30单抗的ELISA试剂盒 (Leerset al., 1999).。 该抗体可以特异性结合caspase-cleaved 角蛋白18 (ccK18, caspase-celaved cytokeratin 18, ccCK18 或者K18-Asp396。caspase水解角蛋白18形成3个片段,其中1个片段 氨基酸第387位-第396位含有新表位(neoeptitope) ,这个片段就称为caspase-cleaved角蛋白,但是不结合天然、未切除的K18。 M30 Apoptosense® 因此可特异性检测上皮细胞的凋亡情况 (Hägget al. 2002).

◆案例?应用

●  监测肿瘤治疗

人经常患的肿瘤包括肺癌,乳腺癌,前列腺癌和结肠癌。这些肿瘤细胞起源于上皮细胞,并且表达K18。肿瘤治疗过程中肿瘤细胞发生凋亡,K18被水解后释放到细胞外和血液中。.相比较而言,其他类型细胞比如淋巴细胞化疗后细胞发生凋亡不会产生K18片段。 Caspase-cleaved CK18 因此成为理想的血液型细胞凋亡标记物。进来研究发现接受不同治疗方案的肿瘤患者,其血清中的caspase-cleaved K18 (ccK18, K18Asp396-NE 或者 M30新表位)有所提高 (Krameret al., 2004Krameret al., 2006)。这个提升与临床治疗有关。 (Olofssonet al., 2007Scottet al., 2009Houet al., 2009).

 肝脏疾病

肝细胞表达K18。在涉及细胞凋亡的肝脏疾病比如肝纤维化、肝脏损伤中K18发生水解,导致组织中M30表位暴露 (Ban et al. 2001)。患有肝细胞凋亡相关的疾病包括丙肝病毒感染(Ban et al., 2004),乙肝病毒感染(Papatheodoridis et al., 2008),非酒精的脂肪肝(NASH)(Wieckowska et al. 2006),毒剂相关脂肪肝(NASH)(Cave et al., 2010),胆道炎症和严重胆汁郁结 (Yagmur et al., 2007)的患者,其血液循环中可溶性caspase-cleaved K18-Asp396片段升高。 

其他运用

由细胞凋亡引起细胞死亡的其他疾病。检测caspase-cleaved K18 片段证实可用于严重白血病患者的早期预测(Hofer et al., 2009).

 M30 Apoptosense® ELISA 可用于监测移植的病人(Luft et al., 2007) ,也可用于肝脏移植期间caspase抑制剂的临床实验 (Baskin?Bey et al., 2007).

产品信息

M30-Apoptosense®ELISA kit (CE-Mark)       

在体内外实验中定量检测上皮细胞的凋亡。使用血浆样品,可以特异性定量检测小鼠模型中人的异种移植物的凋亡情况。

特异性

样品类型

含有从凋亡上皮细胞中释放的CK18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin   plasma);含有CK18阳性的凋亡细胞或者组织的细胞裂解液或者上清

灵敏度

25U/L, Standard A (0U/L)+ 2 S.D.

范围

75-1,000 U/L

检测目标物

可溶性caspase酶解的CK18

特点

可进行定量检测;试剂盒中包含两个阳性对照;预铺ELISA 板(可拆卸)、即用试剂,操作方便;可用于自动化

更多运用案例

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
10011 M30 Apoptosense ®  ELISA
细胞凋亡M30 Apoptosense ® ELISA试剂盒
96 wells