α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

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α-突触核蛋白聚集检测试剂盒
α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟在路易体痴呆、帕金森病、多系统萎缩中发现的细胞内α-突触核蛋白聚集。
本试剂盒可用于在细胞培养水平上,检测目标活性物质对细胞聚集的抑制和/或预防作用。

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒   

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

  α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟在路易体痴呆、帕金森病、多系统萎缩中发现的细胞内α-突触核蛋白聚集。

  本试剂盒可用于在细胞培养水平上,检测目标活性物质对细胞聚集的抑制和/或预防作用。

 

◆背景

  痴呆症是导致记忆和辨别能力退化的疾病,还没有根治的方法。经过多年的科学研究证实,许多神经变性病(包括痴呆症)的大脑退化部位会发生蛋白凝聚,表明这种聚集的出现与这些疾病的发生和发展密切相关。

  正常蛋白形式因特定原因形成异常结构并在细胞中积累时,会发生蛋白聚集,每种疾病有不同的聚集蛋白。目前已知在帕金森病、路易体痴呆、多系统萎缩病人脑内,α-突触核蛋白结构形成异常结构。

  α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟细胞内“α-突触核蛋白”的聚集情况,可用于在体外筛选活性成分。

 

                                                                  α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

 

◆试剂盒组成

组成 容量 规格 保存
pCMV-SNCA (α – Synuclein 表达质粒, 红盖)  
(浓度1.25 μg/μL)
32 μL 1 小瓶 4°C
不冻结
pCMV-NC(阴性对照, 绿盖) 
(浓度1.25 μg/μL)
5 μL 1 小瓶
pCMV-dGFP(dGFP 表达质粒, 蓝盖) 
(浓度1.25 μg/μL)
5 μL 1 小瓶
20 mM Tris-HCl Buffer (pH 7.4) 10 mL 1 瓶
F-αSyn (α – Synuclein 纤维, 黄盖) 
(浓度1 μg/μL)
32 μL 1 小瓶
Multifectam (基因转染试剂) 0.33 mg 1 瓶

 

◆检测流程

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

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◆实例

一  免疫印迹法Western blotting (使用各种突触核蛋白抗体)

1、除去培养基。

2、每个孔添加 1 mL PBS, 用移液器收集细胞。

3、离心 (4,500 rpm [1,800 x g], 5 分钟,室温), 收集沉淀。

4、添加 0.1 mL 裂解缓冲液(10 mM Tris-HCl, pH 7.5 含 0.8 M NaCl, 1 mM乙二醇双(2-胺基乙基醚)-N,N,N,N-四乙酸 (EGTA), 1 mM DTT 和 1% N-月桂酰肌氨酸钠), 超声波混合。

5、离心 (50,000 rpm [100,000 x g], 20 分钟, 室温)。

6、添加 40 µL 2 x SDS Buffer (0.125 M Tris-HCl pH6.8, 200 mM 1,4二硫苏糖醇(DTT), 4% 十二烷基硫酸钠(SDS) , 10%蔗糖, 0.01% BPB) 至颗粒中,超声波混合, 加热 (100 °C,5 分钟), 进行 10 µL/well 的免疫印迹。

 

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

 

二  淀粉样蛋白/物质荧光染色试剂盒

  使用淀粉样蛋白/物质荧光染色试剂盒(Cosmo Bio,产品编号:CSR-SYN02-COS),可对已发生聚集的α-突触核蛋白和核仁进行双重染色。

 

阴性对照载体(pCMV-NC)

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

     相位图                                    核染色                            突触核蛋白聚集

 

使用α-突触核蛋白(pCMV-SNCA+F-α Syn)

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒-疾病研究-wako富士胶片和光

     相位图                                    核染色                            突触核蛋白聚集

 

仅用于研究。不得用于人类基因治疗或临床诊断。

 

产品列表

产品编号 产品列表 包装
CSR-SYN01-COS

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

1 kit
CSR-SYN02-COS

淀粉样蛋白荧光染色试剂盒

1 kit
CSR-SYN03-COS

α-突触核蛋白原纤维

0.1 mg
CSR-SYN04-COS-C100

α-突触核蛋白

0.1 mg
CSR-SYN04-COS-M001

α-突触核蛋白

1 mg
CSR-SYN02-COS

淀粉样蛋白荧光染色试剂盒

1 kit

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒