abbexa abx585151说明书

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人 Isthmin 1 (ISM1) ELISA 试剂盒

货号: abx585151


Human Isthmin 1 (ISM1) ELISA Kit 是一种 ELISA 试剂盒,用于体外定量测量血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解物、细胞培养上清液和其他生物体液中的 Human Isthmin 1 (ISM1) 浓度。

介绍 Isthmin 1 (ISM1) 是一种抑制新血管形成的蛋白质。在非洲爪蟾中发现,ISM1 预计具有与血管生成和胚胎发育相关的功能。目前没有与这种蛋白质密切相关的疾病。
目标 地峡 1 (ISM1)
反应性 人类
测试应用 酶联免疫吸附试验
推荐稀释 最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。
贮存 在 4 °C 下运输。收到后,按照套件手册中的存放说明存放套件。
有效性 该套件的有效期为 6 个月。
稳定 试剂盒的稳定性取决于活性损失率。在适当的储存条件下,保质期内损失率小于5%。为了尽量减少性能波动,应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个测定由同一用户自始至终执行。
测试范围 0.156 纳克/毫升 – 10 纳克/毫升
灵敏度 < 0.07 纳克/毫升
标准格式 冻干
检测方法 比色法
检测类型 三明治
检测数据 定量的
样品类型 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解物、细胞培养上清液和其他生物液体。
目标类型 抗原
测定原理 该试剂盒基于夹心酶联免疫吸附测定技术。将抗体预涂在 96 孔板上。将标准品、测试样品和生物素结合试剂添加到孔中并孵育。然后加入 HRP 偶联试剂,并孵育整个板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB 底物用于量化 HRP 酶促反应。加入 TMB 底物后,只有含有足够 ISM1 的孔才会产生蓝色产物,然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与板上的 ISM1 量成正比。光密度 (OD) 在酶标仪中以 450 nm 分光光度计测量,从中可以计算 ISM1 的浓度。
套件组件 列出的套件组件仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册中的说明使用,并与产品一起交付。

  • 预涂层 96 孔微孔板

  • 标准

  • 标准稀释缓冲液

  • 洗涤缓冲液

  • 检测试剂A

  • 检测试剂B

  • 稀释剂 A

  • 稀释剂 B

  • TMB基板

  • 停止解决方案

  • 封板机

需要但未提供的材料
  • 37°C 培养箱

  • 多通道和单通道移液器和无菌移液器吸头

  • 喷瓶或自动微孔板清洗机

  • 1.5 毫升试管

  • 蒸馏水

  • 吸水滤纸

  • 100 毫升和 1 升量筒

  • 酶标仪(波长:450 nm)

  • ELISA 摇床

试剂制备 此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册中的说明使用,并与产品一起交付。

  • 1) 标准品:用推荐体积的标准稀释缓冲液配制标准品,制成标准溶液。然后按照协议中的说明,使用标准稀释缓冲液对标准溶液进行系列稀释。

  • 2) 洗涤缓冲液:按照方案中的说明,用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

  • 3) 检测试剂制备:计算所需工作溶液的总体积。分别用稀释剂 A 和稀释剂 B 以 1:100 稀释检测试剂 A 和检测试剂 B。

检测程序 此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册中的说明使用,并与产品一起交付。

  • 1) 设置标准、测试样品和对照孔。

  • 2) 将 100 µl 稀释标准品分装到标准孔中。

  • 3) 将 100 µl 标准稀释缓冲液分装到对照(零)孔中。

  • 4) 将 100 µl 稀释样品分装到样品孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

  • 5) 将 100 µl 检测试剂 A 分装到每个孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

  • 6) 洗涤 3 次。

  • 7) 将 100 µl 检测试剂 B 分装到每个孔中。在 37°C 下孵育 30 分钟。

  • 8)洗涤5次。

  • 9) 将 90 µl TMB Substrate 分装到每个孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分钟。

  • 10) 分装 50 µl 终止液。

  • 11) 在 450 nm 处测量 OD。

协议 此过程仅供参考。产品手册可能略有不同。产品应按照随附的产品手册中的说明使用,并与产品一起交付。

  • 使用前将套件组件和样品平衡至室温 (18 – 25 °C)。建议为每个测试绘制标准曲线。

  • 1. 在预涂板上分别设置标准孔、测试样品孔和对照(零)孔,然后记录它们的位置。建议至少测量每个标准和样品一式两份。

  • 2. 将 100 µL 每个标准品、质控品和样品加入适当的孔中。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 1 小时。

  • 3. 取下盖子并丢弃液体。

  • 4. 每孔加入 100 µl 检测试剂 A 工作溶液。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 1 小时。

  • 5. 取下盖子并丢弃溶液。用 1X 洗涤缓冲液洗涤板 3 次。

  • 6. 每孔加入 100 µL 检测试剂 B 工作溶液,密封并在 37°C 下孵育 30 分钟。

  • 7. 弃去溶液并用洗涤缓冲液洗涤板 5 次,如上一步所述。

  • 8. 将 90 µl TMB Substrate 分装到每个孔中。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 10-20 分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考,最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟。

  • 9. 每孔加入 50 µL 终止液。立即在 450 nm 处读取。

结果计算 为了计算,平均每个参考标准和每个样品的 OD450 重复读数,并减去平均对照(零)OD450 读数。标准曲线可以绘制为每个参考标准溶液的相对 OD450 [Y] 与每个标准溶液的相应浓度 (X)。样品的 ISM1 浓度可以从标准曲线中插值。
分析精度 Intra-assay Precision (Precision within an assay):在一个板上分别测试了 3 个具有低、中和高水平 Isthmin 1 (ISM1) 的样品 20 次。
测定间精密度(测定之间的精密度):在 3 个不同的板上测试了 3 个具有低、中和高水平的 Isthmin 1 (ISM1) 的样品,每个板重复 8 次。
CV (%) = (标准偏差/平均值) × 100
测定内:CV<10%
测定间:CV<12%
可用性 5-7 个工作日内发货。
笔记 本产品仅供研究使用。范围和灵敏度可能会发生变化。请联系我们获取最新的产品信息。为了获得准确的结果,样品浓度必须稀释至试剂盒的中间范围。如果您需要特定范围,请提前联系我们或在您的订单评论中写下您的要求。请注意,我们的 ELISA 和 CLIA 试剂盒针对天然样品而非重组蛋白的检测进行了优化。我们无法保证检测到重组蛋白,因为它们可能具有与天然蛋白不同的序列或三级结构。
标准 100 纳克/毫升