德国Biontex转染试剂简介

 

德国Biontex转染试剂简介
Biontex 公司成立于1998年,其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried,专注于转染试剂的研发和应用。

(一) K2® Transfection System ,Biontex最新产品
全新高效的哺乳动物细胞DNA和mRNA转染工具



产品特点:


真核细胞依赖自身的先天性免疫系统,能够识别并抑制外来物质(如脂多糖、细菌、病毒核酸及蛋白质)的入侵。此外,细胞还可以将这些外来物质的信息通过信号分子传导给相邻的细胞,使这些临近细胞在无需接触病原体的情况下产生防御体系。
为降低细胞自身的免疫反应,提高基因转染效率,Biontex公司最新开发了K2® Transfection System,由K2® Transfection Reagent 和 K2® Multiplier两部分组成。K2® Transfection Reagent是一种高效的阳离子脂质,而K2®Multiplier则可以降低细胞对外来核酸及脂质体的免疫反应。

应用实例1:

K2转染pCMV-GFP的效率® 转染系统和Metafectene Pro与几种细胞系的市售转染试剂L2k进行了比较。

应用实例2:


产品订购信息:

产品名称 货号 规格
K2® Transfection System T060-8.0 1.5 ml Transfection reagent
6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System T060-8.2 2 X 1.5 ml Transfection reagent
2 X 6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System T060-8.5 5 X 1.5 ml Transfection reagent
5 X 6.5 ml Multiplier




(二)METAFECTENE® SI+
特别适合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的高效转染试剂

特点:

METAFECTENE® SI+是一种脂质复合物,经特殊优化适用于siRNA和microRNA转染(siCOM技术),综合了Biontex公司RMA和TOP技术的特点,具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等优点,适用于所有细胞系和原代细胞。

siCOM技术(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA转染试剂,本技术不需要将siRNA和miRNA转运到细胞核。因此,METAFECTENE® SI+主要目的在于大化的内吞作用并快速*释放RNA进入细胞质。

转基因HeLa-GFP细胞GFP表达序列的研究® SI+和siRNA直接作用于GFP的mRNA。清晰可见的是GFP表达在72小时内下降到最大值。


产品订购信息:

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® SI+ T100-1.0 1 ml RNA transfection reagent
2 ml SI+ buffer (10x)
METAFECTENE® SI+ T100-2.0 2 X 1 ml RNA transfection reagent
2 X 2 ml SI+ buffer (10x)
METAFECTENE® SI+ T100-5.0 5 X 1 ml RNA transfection reagent
5 X 2 ml SI+ buffer (10x)





(三) METAFECTENE® EASY
更快、更简便、更高效的转染技术

特点:


在开发第二代DNA转染试剂(METAFECTENE®及其升级版本METAFECTENE®PRO)的时候,Biontex的主要目标是大化转染效率(RMA技术)和最小化毒性作用(TOP技术)。进一步开发的Biontex FEE技术预示着第三代质粒转染试剂的开始:METAFECTENE®EASY+

FEE技术
FEE技术是优化的具更高转染效率的技术,通过固定DNA /脂质体比率和转染复合物体积而适用于广泛的细胞类型。不需要针对每种细胞类型进行费时、费力的条件优化。

变质体® EASY的转染效率与METAFECTENE相当® 无需优化DNA/脂质体(深蓝色柱:COS-7,浅蓝色柱:HeLa细胞)。

产品订购信息:

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® EASY+ T090-1.0 1 ml Transfection reagent
2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE® EASY+ T090-2.0 2 X 1 ml Transfection reagent
2 X 2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE® EASY+ T090-5.0 5 X 1 ml Transfection reagent
5 X 2 ml EASY+ buffer (10x)





(四)METAFECTENE® PRO
真核细胞的高效、低毒性转染试剂

METAFECTENE® PRO是针对哺乳动物细胞的新一代转染试剂。采用毒性优化技术(TOP技术),Biontex成功地降低了转染试剂对细胞的毒性,并显著提高DNA进入细胞的效率。除了能加强细胞的转染效率之外,METAFECTENE® PRO的另一个主要特点是提高细胞内基因的表达。


TOP技术(Toxicity Optimization Module)
毒性最小化是现代转染试剂达到率和广泛应用性的首要前提条件。TOP技术的基本准则是模拟物质天然结构,加强生物降解能力,提高细胞耐受性。另外,通过物理化学修饰,降低脂质复合体的稳定性,从而促进DNA在细胞质的释放。


METAFECTENE转染效率的比较® PRO与各种细胞系(代谢物)® 100%)

产品订购信息:

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® PRO T040-1.0 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® PRO T040-2.0 2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® PRO T040-5.0 5 X 1 ml Transfection reagent




(五)METAFECTENE®



RMA技术(Repulsive Membrane Acidolysis)
排斥膜酸水解(RMA)技术,一方面能促进细胞内涵体中“质子海绵”的活性,另一方面能促进脂质体复合物分解,通过小片段质子化结构模拟磷脂结构。当内涵体处于酸性环境时,正电荷累积在脂质体复合物的磷脂双分子结构中,通过电荷的排斥力,这些电荷最终引起脂质体复合物的分解,同时高效地将DNA/RNA释放到细胞质中。
最后,胞质中非络合的DNA/RNA急剧增多,以DNA为例,这个结果导致其在胞质中的活性显著提升,DNA与细胞核接触的可能性增加,从而大大提高转染效率。

产品订购信息:

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® T020-1.0 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® T020-2.0 2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® T020-5.0 5 X 1 ml Transfection reagent



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产品名称 产品介绍 规格 货号
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广泛适用于各种蛋白质转染和各种细胞类型
低毒性,全血清耐受
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0.1 ml

0.25 ml

0.5 ml

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E020-0.25

E020-0.5


二、自主生产的转染试剂:HTfect transfection kit

HTfect transfectionKit是盎然生物技术有限公司研发的一种高效、低毒、廉价且重复性好的新型转染试剂,适用于大部分细胞类型。本产品特别适合于HEK293、HeLa、HT1080等细胞的转染,在重组蛋白表达,病毒包装, microRNA靶基因3’-UTR分析、co-IP等实验中用途广泛。同时,本产品也不受血清的干扰,实验操作简单。
产品优势

使用实例
用HTfect transfection kit 将3 μgpLVX-cmyc-EGFP质粒转染HEK293细胞,两天后使用Olympus倒置荧光显微镜(IX71)进行观察和拍照。(左图为明场细胞图像,右图为绿色荧光细胞图像)。


产品订购信息:

产品名称 货号 规格
Htfect transfection kit AB-TP1001 Sol.A 1.25 ml
Sol.B 20 ml
Htfect transfection kit AB-TP1002 Sol.A 2.5 ml
Sol.B 40 ml
Htfect transfection kit AB-TP1003 Sol.A 5 ml
Sol.B 80 ml
    1. 通过抑制细胞对外源DNA的免疫反应来提高转染效率,特别适用于转染人类细胞
    2. 多数情况下,比其他常见转染试剂(如,Lip2K)有更高转染效率
    3. 细胞毒性较低
    • 整合了RMA和TOP技术
    • 沉默效率更高,siRNA用量更少
    • 操作简便、快速,适合大规模筛选
    1. 快速:一次转染实验只需3天
    2. 简便:优化条件时,只需摸索两个固定的 DNA:lipid比例
    3. 高效:升级产品提高了转染效率,进一步降低毒性
    4. 经济:EASY+的显著特征,EASY+降低了核酸复合物(DNA +脂质)所需要的体积,节约至少50%的成本
    1. METAFECTENE®是一种基于脂质体的包含阳离子和中性脂质的复合物,在DNA转染哺乳动物细胞时达到很高的转染效率。属于第二代转染试剂。
    2. RMA技术是高效转染率的保证。另外,METAFECTENE®的低毒性和耐受血清抑制等特性使其具有广泛的应用空间。
    1. 转染效率高,尤其对HEK293T细胞的转染效率高达95%以上。
    2. 细胞毒性小,显著低于L2K等试剂。
    3. 转染过程中无需更换无血清培养液,操作简单。
    4. 性价比高,特别适合大规模转染实验,如表达重组蛋白或者包装病毒等。
    5. 结果重复性好。