多功能DNA/siRNA 转染试剂说明书

 

polyplus-transfection 多功能 DNA/siRNA 转染试剂说明书

jetPRIME ®

  •  高DNA转染效率
  •  核酸含量低
  •  细胞活力
  •  一种用于 DNA 和/或 siRNA 转染的试剂
  •  性价比高
  •  

规格

试剂

jetPRIME ®

分子交付

DNA, siRNA, DNA & siRNA

应用

质粒转染
基因组编辑
病毒生产
siRNA 转染
不同核酸的共同递送

细胞类型

在血清存在下生长的贴壁细胞系

转染次数

1.5 ml jetPRIME ®转染试剂足以在 24 孔板中进行多达 1500 次转染或在 6 孔板中进行 375 次转染

贮存

5°C ± 3°C,适当储存可稳定至少一年

提供

jetPRIME 缓冲区


概括

 

jetPRIME® 是一种功能强大且用途广泛的 DNA 和 siRNA 转染试剂,适用于日常实验,可产生高效可靠的科学结果。jetPRIME® 可确保在各种贴壁细胞中实现高 DNA转染效率和出色的基因沉默。jetPRIME ® 也是DNA/siRNA 共转染或多种质粒共递送的理想选择。此外,我们的 jetPRIME® 试剂对细胞非常温和,因为它在转染过程中需要少量的试剂和核酸。

订购信息

参考编号 试剂量 缓冲量
114-01 0.1毫升 5毫升
114-07 0.75 毫升 60毫升
114-15 1.5 毫升 2 x 60 毫升
114-75 5 x 1.5 毫升 10 x 60 毫升
712-60 X 60毫升

 

1.5 ml 足以在 6 孔板中进行约 375 次转染

 

描述

转染效率

jetPRIME ®是一种适用于日常实验强大转染试剂它导致各种来源的转染贴壁细胞系以及原代细胞的比例异常高。

 与竞争对手的试剂相比,使用 jetPRIME ®试剂获得了 70% 至 90% 的转染效率(图 1 和图 2)。

图 1:jetPRIME 与其主要竞争对手的转染效率比较。在 24 孔板中转染后 24 小时,通过 FACS 分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对 Lipofectamine ® 2000 和 jetPRIME ®的推荐使用条件

图 2:jetPRIME ®与 Lipofectamine ® 3000 的转染效率比较在 96 孔板或 24 孔板中转染后 24 小时,通过 FACS 分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对 lipofectamine ® 3000 和 jetPRIME ®的推荐使用条件

成本效益:更少的 DNA 和更少的试剂

jetPRIME ® 是一种强大的体外转染试剂,需要少量试剂和质粒 DNA,因此使用起来非常经济高效 (表 1)。

表 1:推荐使用条件。根据制造商的建议,用于转染的 6 孔板中每孔 DNA 和试剂(jetPRIME ®和竞争对手)的数量。

除了降低成本之外,使用更少的 DNA 还可以最大限度地减少转染引发的不利细胞毒性作用。因此,jetPRIME ® 是实现高转染效率和出色细胞活力的试剂

更好的细胞活力

jetPRIME ® 在转染过程中对细胞极其温和,从而提高细胞活力并改善转染结果。用 jetPRIME ®转染的细胞 是健康的,而竞争者则观察到主要的细胞毒性(图 3)。

图 3:转染后 24 小时的细胞活力。根据制造商对每种试剂的建议,在转染后 24 小时对 HeLa 细胞进行相差显微镜检查。

易于使用的协议

jetPRIME ® 是一种易于使用的转染试剂(图 4):

  • 快速且轻松地扩大和缩小规模
  • 与血清和抗生素兼容

图 4:jetPRIME ®协议。方便的 DNA、siRNA 和 DNA 和 siRNA 共转染方案。

在我们的博客部分查看我们的 专家提示,以加快 DNA 转染。

 

 

应用

质粒转染

jetPRIME ®导致各种来源的转染贴壁细胞系以及原代细胞的比例非常高(表 1)。

表 1:使用 jetPRIME ®的各种细胞类型的转染效率转染后 24 小时通过 FACS 分析确定 GFP 阳性细胞的百分比。

质粒是在细菌中常见的环状 DNA 小分子。质粒与染色体 DNA 分开存在和复制,并且在细菌中它们通常携带有利于细菌生存的基因。质粒可被有意引入所需细胞并用于在特定细胞系中过表达感兴趣的基因。此过程称为 DNA 转染,是研究基因功能或目标蛋白质的常用方法。

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基因组编辑

CRISPR/Cas9 系统在哺乳动物细胞中的使用最近成为一种在特定位点修改细胞基因组的非常方便的方法。它涉及将 (a) 一个或多个编码 Cas9、特定 gRNA 和最终插入序列的质粒瞬时转染到哺乳动物细胞中,或 (b) 一个或两个质粒和一个 RNA 分子(gRNA)的混合物.

可用应用说明: 使用 jetPRIME ® 进行CRISPR/Cas9 介导的基因破坏

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siRNA转染

jetPRIME ® 导致多种细胞系中内源基因表达的抑制率超过 90%。例如,jetPRIME ®介导的HeLa 细胞转染与10 nM siRNA 双链体靶向HeLa 细胞中的内源性核层蛋白A/C 显着降低了核纤层蛋白A/C 基因的表达水平(图1)。

图 1:使用 jetPRIME ® 的内源性 lamin A/C 静音用 10 nM 的 21-mer 核纤层蛋白 A/C siRNA 转染 HeLa 细胞。48 小时后,使用抗 lamin A/C 抗体通过免疫荧光显微镜评估 lamin A/C 沉默。

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不同核酸的共转染

jetPRIME ® 非常适用于 DNA 和 siRNA/miRNA共转染实验或多种 DNA 质粒的共递送。

我们使用 jetPRIME ®进行了 DNA 和 siRNA 递送,在各种细胞系中观察到高效的基因沉默且毒性极低。使用 10 nM siRNA 在贴壁细胞中实现了超过 90% 的沉默(图 2)。

图 2:使用 jetPRIME ® 共转染 DNA 和 siRNA 后,几种细胞系中的外源荧光素酶沉默在 6 孔板中,每孔使用 400 ng p4CMV-Luc 和 10 nM 荧光素酶 siRNA 进行实验。

 

 

质量

每批 jetPRIME ®试剂都通过用表达 GFP 的质粒对 HeLa 细胞进行 DNA 转染进行内部测试,并且每瓶试剂都提供分析证书。