BioGenes 中文介绍

BioGenes新一代宿主细胞残留蛋白(HCPELISA检测试剂盒

准确定量检测残留的宿主细胞残留蛋白(HCP)是病毒性疫苗或基因工程产品生产的关键质控标准。BioGenes公司优化的360 – HCP检测试剂盒检测宿主细胞蛋白(HCP)比传统检测具有显著的优势。通过提供四个试剂盒包(每个包使用不同的anti-HCP抗体),通过比较选取zui适检测试剂盒检测HCP,增加了HCP检出的特异性和灵敏度。因此可zui大限度的减少了anti-HCP抗体不能*检测终产品中HCP的可能性。而传统的HCP检测只是使用一个抗体进行检测,因此增加了部分HCP不能检出的可能性。

 

BioGenes产品说明书:

1CHO|360-HCP ELISA

CHO|360-HCP ELISA是为中国仓鼠卵巢细胞(CHO)作为宿主细胞的生物制品进行HCP检测的试剂盒,拥有高度特异性和灵敏度,覆盖率更多的CHO蛋白谱。

通过用模拟转染CHO-K1 CHO-S细胞的HCP免疫家兔或山羊,然后结合BioGenes公司*的抗原和抗体制备技术(优化的蛋白纯化技术)得到HCP多克隆抗体。使用事先准备好的不同抗原(总HCP或分级HCP)每个分级HCP分别用于免疫动物,因而得到四个不同HCP ELISA检测试剂盒(AD),这四个试剂盒共同组成360 – HCPHCP ELISA检测体系。

 

HCP超级检出率:

CHO|360-HCP ELISA试剂盒经大量的模拟CHO-HCP样本检测测试。在大多数情况下可以从四个检测试剂盒中找出*的HCP检出率的试剂盒。如上图样本4可以看出,D型试剂盒可以检出大于90%HCP,比ABC三种类型更为适用于该样本,而普通商业化的检测试剂盒只能检出约20%HCP

 

 

 

更高的检测特异性:

LOD0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ 2 – 3 ng/mL

检出范围:2 – 100 ng/mL

 

2E.coli|360-HCP ELISA

E.coli |360-HCP ELISA是为大肠杆菌(E.coli)作为宿主细胞的生物制品进行HCP检测的试剂盒,拥有高度特异性和灵敏度,覆盖率更多的E.coli蛋白谱。

E.coli|360-HCP Assay试剂盒是利用在不同培养基和培养条件下发酵的W3110BL21(DE3) 细胞株产生四种具有不同HCP蛋白谱的抗原。然后用这四种抗原免疫山羊得到四种不同的HCP ELISAs试剂盒(AD),四者共同构成E.coli|360-HCP Assay 检测体系。可通过考马斯染色E.coli HCP和不同抗体的2D western blotting 检测确定zui高特异性的试剂盒。

 

HCP超级检出率:

E.coli |360-HCP ELISA试剂盒经大量的模拟大肠杆菌-HCP样本检测测试。如上图可以看出,可以看出,B型试剂盒可以检出样本1中大于 80%HCPA型试剂盒是样本23的*检测试剂盒,而样本5的*检测试剂盒是D型试剂盒。

 

 

更高的检测特异性:

LOD0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ 2 – 3 ng/mL

检出范围:2 – 100 ng/mL

 

3、*试剂盒选择的方法:

如实验中选取中国仓鼠卵巢细胞(CHO)作为宿主细胞,则选择CHO|360-HCP ELISA试剂盒进行HCP检测;如实验中选取大肠杆菌(E.coli)作为宿主细胞,则选择E.coli |360-HCP ELISA试剂盒进行HCP检测。然后根据以下方法对具体的试剂盒型号进行选择。

1)预实验选取法:

该方法是采用The 360-HCP ELISAs Starter Set包(内含A-D型四种不同的检测试剂盒),通过预实验选取zui适试剂盒类型进行后续实验。实验流程如下图:

 

 

2BioGenes公司鉴定服务推荐法

除上述客户自行确定*试剂盒法外,BioGenes还提供试剂盒性能试验并推荐*试剂盒的服务。

方法1

360-HCP ELISA kits (type A to D)检测含HCP样本,流程为:

1)客户提供4-8个不同纯化阶段的样本;

2)两次重复实验进行确定;

3)每个样品多达4个稀释倍数;

4BioGenes推荐一个*的ELISA检测试剂盒类型,同时附一个简短的推荐报告。

方法2

2-D蛋白印记分析模拟的HCP2-D蛋白印记分析可以获得抗HCP抗体对存在于宿主细胞株中全部HCP的范围评估信息,以获取确信的zui适抗体类型和水平,流程为:

12-D 分离和考马斯蓝银染色和银染;

2)使用不同抗体稀释度进行免疫印迹;

3)完成包括蛋白范围的报告;

4)推荐zui适ELISA检测试剂盒类型,同时附一个简短的推荐报告。