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Nageotte计数室推荐红细胞制品白细胞计数方法

NAGEOTTE COUNTING CHAMBER SUGGESTED METHOD FOR COUNTING LEUKOCYTES IN RED CELL PRODUCTS

1.0 SCOPE

1.1

这种计数方法描述了一种用于可视化计数白细胞的方法，这些白细胞存在于白细胞贫乏的血液或红细胞包装产品中。，

 

1.2该方法的灵敏度为0.1白细胞/毫升，应用于白细胞耗竭的程序。

 

在Hausser计数室中将计数降低到低于5白细胞/升的水平。

2.0

设备，装备

 

-具有大尺寸盖板卡瓦（带腔室）的NageFlowt计数室

 

-Turk溶液

 

10-100 pl吸管

 

-10-1000 Pl移液器

 

-10-1000PL吸管

 

~-12×75 mm塑料试管

 

配备20倍物镜的实验室显微镜(10倍目镜)

 

覆有湿滤纸的培养皿

 

3.0   程序，手续

 

3.1标号试管。

 

3.2在每根管子上加入900 Pl的Turk溶液。

 

3.3在适当标记的试管中加入100 Pl，使每个样品稀释1：10。

 

多次冲洗吸管针尖，以确保样品被转移到稀释剂中。

 

3.4用涡旋法将稀释后的样品混合均匀，静置10分钟(不超过1小时)，将红细胞溶解。

3.5.将稀释后的样品再次混合，取出：-600升加入吸管。小心地把盖子放在一个干净的，干燥的Nageotte室上。盖子滑块必须地集中在密室上。小心 加载Nageotte计数室，不干扰盖的滑动，直到它是满的。从气室一侧加载，只为了防止空气被困住。一次请勿打扰盖子。 他的房间里装了子弹。

 

3.6允许小室在潮湿的培养皿中休息15分钟，使白细胞沉降。在30分钟内清点样品。

 

3.7通过在网格区域来回扫描来计数白细胞。计数区域内的所有白细胞(即40个矩形)，包括接触所有线的细胞。

 

3.8在一个网格区域内计算所有40个矩形-这是次计数。

 

3.9移至第二个栅格区(以上或低于已计算的区域)，并计算类似的区域(3.7-3.8)。这是重复计数。

 

3.10计算白细胞/细胞使用下列公式：

 

扬声器细胞/pl=出售计数x稀释体积计数(Ul)