Favorgen FABGK000-Maxi说明书

Favorgen  FABGK000-Maxi说明书

Favorgen位于中国台湾国家生物技术园区。它通过自动化系统建立了ISO合格工厂,
生产高质量的分子生物学产品和临床化学试剂。目前,Favorgen在美国,中国,韩国和丹麦设立分支机构,并在30多个国家设立了分销网络。自成立以来,Favorgen已经在其先进的生产设施上投入了大量资金,以竞争力的价格为客户提供高质量的产品。Favorgen致力于通过与学术和行业合作伙伴的内部和合作开展研究,以不断提供高质量的创新产品。

 

 

Nucleic-acids extraction Genomic DNA Extraction

核酸提取基因组DNA提取

 

Favorgen  FABGK000-Maxi说明书

 

FavorPrepTM Blood / Cultured Cell Genomic DNA Extraction Maxi Kit

(For Research Use Only)

 

Cat. No.

/ preps

FABGK000-Maxi

(2 preps)

FABGK003

(10 preps)

FABGK003-1

(24 preps)

 

 

Proteinase K powder+ 11 mg x 2 11 mg x 10 11 mg x 24

FABG Buffer 22 ml 110 ml 265 ml

W1 Buffer* (concentrated) 6.5 ml 33 ml 88 ml

Wash Buffer** (concentrated) 3 ml 20 ml 40 ml

Elution Buffer 6 ml 30 ml 60 ml

FABG Maxi Column 2 pcs 10 pcs 24 pcs

Elution Tube (50 ml tube) 2 pcs 10 pcs 24 pcs

User Manual 1 1 1

Preparation of ProteinaseK solution (20mg/ml) and Wash Buffer for first use:

Cat. No:

FABGK000-Maxi

(2 preps)

FABGK003

(10 preps)

FABGK003-1

(24 preps)

+ ddH2O volume for Proteinase K

0.5 ml

* ethanol volume for Wash Buffer W1

2.5 ml

12 ml

32 ml

**ethanol volume for Wash Buffer W2

12 ml

80 ml

160 ml

 

 

 

 

 

规格:

 

原理:自旋柱(硅胶膜)

 

样本大小:新鲜/冷冻血液10毫升;培养细胞1×10 8

 

柱容量:500微克DNA

 

平均DNA产量:35g/1ml全血处理时间:1小时

 

洗脱体积:0.75~1.5ml

 

需由用户提供的材料

 

吸管和管尖

 

离心机:应能产生4,000克热孵化器的力

 

烘箱(可选)乙醇(96%~100%)涡旋

 

重要说明:

 

本系统中提供的缓冲区包含刺激物。在处理这些缓冲器时,戴上手套和实验室外套。

 

手术前将热孵化器预热至60°C。

 

在所有的离心步骤中,使用带有摆动桶转子的离心机和4,000~6,000克的力。

 

将500升无菌的ddH2O加入到延长K管中,制成22毫克/毫升的原液。确定蛋白酶K粉已*溶解。将库存溶液存放在4°C。

 

为步骤11(释放步骤)过热释放缓冲器或ddH2O。

 

血液DNA提取协议

 

在开始以下步骤之前,请阅读重要说明。

 

将多达10毫升的样本(全血、布菲大衣)转移到50毫升离心管(未提供)。

 

–如果样品体积小于10mL,则加入PBS使体积达到10mL。

 

在样品中加入500升蛋白酶K(20 mg/ml),用旋涡法搅拌均匀。在样品混合物中加入10毫升的光纤光栅缓冲液。通过脉冲旋涡充分混合.

 

-不要直接将蛋白酶K添加到FABG缓冲液中。

 

将样品混合物在60℃下孵育15分钟,以使样品分离。在孵化过程中,每3-5分钟倒置一次.

 

(可选):如果需要无RNA的基因组DNA,在样品混合物中加入80毫升100毫克/毫升的核糖核酸酶A(未提供),在室温下孵育10分钟。

 

在样品中加入10 ml乙醇(96~100%)。通过漩涡充分混合。如果出现沉淀物,就用喷入的方法打破它。

 

将FABG Maxi柱放置在50毫升离心管上(未提供)。并将15毫升的样品混合物(添加乙醇)(包括任何沉淀物)仔细转移到FABG Maxi柱。关上盖子 4,000~6,000×g离心3 min。

 

 

英语字母表的第22个字母 1115

 

丢弃流道,将剩余的样品混合物转移到相同的FABG Maxi柱上.关闭盖和离心机在4,000~6,000 x g,3分钟,并丢弃流过.

 

8在FABG Maxi柱上加入4ml W1缓冲液(乙醇加乙醇)。关闭盖子,在4,000~6,000×g离心3 min。丢弃流道,将fbg maxi柱放回50毫升。 离心管。

 

-确保乙醇在次打开时已加入W1缓冲液。

 

在FABG Maxi柱上加入7毫升的洗涤缓冲液(加入乙醇)。关闭盖子,在4,000~6,000×g离心15 min。丢弃流道,将fbg maxi柱放回50毫升。 离心管。

 

–在次打开时,确保已将乙醇添加到清洗缓冲液中。

 

-重要的一步!确保离心后残余液体被*除去。可能需要在70°C的真空烘箱中继续干燥3英里。 lutes[人名] 卢茨

 

将FABG Maxi柱放入新的50毫升离心管中。(洗脱管,提供)

 

FABG Maxi柱膜中心加入0.75~1.5ml预热洗脱缓冲液或ddH2O(pH7.5-9.0)。将FABG马溪柱在室温下放置5 min。

 

-重要的一步!若要进行有效洗脱,需在FABG Maxi柱上放置5分钟,以确保洗脱缓冲液被柱膜*吸收。

 

-标准体积为0.75~1.5ml。如果需要更高的DNA产量,重复DNA排出步骤(步骤11),以提高DNA恢复。

 

4,000×g离心2分钟,以逃避总DNA。

 

程序:(用于培养细胞DNA的提取)

 

将多达1×108个细胞转移到50毫升离心管(未提供)。4,000~6,000 x g离心5 min,使细胞颗粒化。(如果使用贴壁细胞,则在Harv之前将细胞胰蛋白酶化。 besting1。[口]打败,胜过( best的现在分词 )

 

用10毫升PBS刺激细胞。

 

从第4步开始遵循血液协议。

 

 

发现并修理故障,解决纷争

Possible reasons

Solutions

Low or no yield of genomic DNA

Poor cell lysis

Poor cell lysis because of insufficient Proteinase K activity

Repeat the extraction procedure with a new sample. Use a fresh

or well-stored Proteinase K stock solution.

Poor cell lysis because of insufficient mixing with FABG buffer

Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the sample and FAGB Buffer immediately and thoroughly by pulse-vortexing.

Poor cell lysis because of insufficient incubation time

Repeat the extraction procedure with a new sample. Extend the incubation time and make sure that no residual particulates remain.

Ethanol is not added into the lysate before transfer- ring into FAGB Maxi Column

Repeat the extraction procedure with a new sample.

Incorrect preparation of Wash Buffer

Ethanol is not added into W1 and Wash Buffer when first

Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample.

The volume or the percent- age of ethanol is not correct before adding into W1 and Wash Buffer

Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample.

 

Possible reasons

Solutions

Elution of genomic DNA is not efficient

pH of water elution is acidic

(ddH2O)

for

Make sure the pH between 7.5- 9.0.

of ddH2O

is

Use Elution Buffer elution.

(provided)

for

Elution Buffer or ddH2O is not completely absorbed by column membrane

After Elution Buffer or ddH2O is added, stand the FAGB Maxi Column for 5 min before centrifuga-

Column is clogged

Blood sample contains clots

Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the blood sample well with anti-coagulant to prevent formation of blood clots.

Sample is too viscous

Reduce the sample volume.

Degradation of elutated DNA

Sample is old

Always use fresh or well-stored sample for genomic DNA extraction.

Buffer for gel electrophoresis contaminated with DNase

Use fresh running buffer for gel electrophoresis.

 

 

 

基因组DNA提取血液DNA Mini / Midi / Maxi试剂盒

FABGK 000

FavorPrep™血液/培养细胞基因组DNA提取迷你试剂盒

4个准备。

蛋白酶K粉末
FATL缓冲液
FABG缓冲液
W1缓冲液
洗涤缓冲液(浓)
洗脱缓冲液
FABG迷你柱
2ml收集管
1.5ml洗脱管

在室温(15~25℃)下保存2年。
除蛋白酶K粉外,贮存于4℃。

FABGK 001

50个准备。

FABGK 001-1

100个准备。

FABGK 001-2

300个准备。

FABGK 100

FavorPrep™血液/培养细胞基因组DNA提取迷你试剂盒

100个准备。

RBC裂解缓冲液 FATL缓冲液 FABG缓冲液 W1缓冲液 洗涤缓冲液(浓) 洗脱缓冲液FABG迷你柱 2ml收集管 

 

在室温(15~25℃)下保存2年。
除蛋白酶K粉外,贮存于4℃。

FABGK 300

300个准备。

 

 

FABGK 002-S

FavorPrep血液/培养细胞基因组DNA提取Midi试剂盒

2个准备。

蛋白酶K粉末
FABG缓冲液
洗涤缓冲液W1(浓)
洗涤缓冲液W2(浓)
洗脱缓冲液
FABG Midi柱
15 ml洗脱管

在室温(15~25℃)下保存2年。

除蛋白酶K粉外,贮存于4℃。

FABGK 002

20个准备。

FABGK000-MAXI

FavorPrep™血液/培养细胞基因组DNA提取Maxi试剂盒

2个准备。

Proteinase K Powder 
FABG Buffer 
W1 Buffer 
Wash Buffer(浓)
洗脱缓冲液
FABG Maxi Columns 
50 ml Elution tubes

在室温(15~25℃)下保存2年。
除蛋白酶K粉外,贮存于4℃。

 

 

 

 

 

 

 

 

上海金畔生物是实验试剂一站式采购服务商

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