haemtech HCVWF-0190说明书

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haemtech Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注册公司，是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质，以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质，包括酶原，酶，辅因子和抑制剂，以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管，用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化，蛋白质修饰，化验开发，合同制造和合同研究。

 

haemtech HCVWF-0190说明书

von Willebrand因子（和VIII免费）

血管性血友病因子
的多聚体结构说明了具有结合因子VIII的1.8MDa von Willebrand因子（vWF）多聚体的形成。每个vWF单体（Mr = 260,000）在分子的NH2末端附近含有因子VIII结合位点。单体通过二硫键端对端地连接（NH 2至NH 2和COOH至COOH）以形成大的多聚体。成熟的多聚体可以每个单体亚基结合一个因子VIII分子。

 

 

HCVWF-0190 Human von Willebrand Factor

Size

100 µg

Formulation

25 mM NaCitrate, 100 mM NaCl, 100 mM Glycine, pH 6.8

 

Storage

-80°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

N/A

Shelf Life (properly stored)

12 months

HCVWF-0191 Human von Willebrand Factor – VIII “Free”

Size

100 µg

Formulation

25 mM NaCitrate, 100 mM NaCl, 100 mM Glycine, pH 6.8

 

Storage

-80°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

N/A

Shelf Life (properly stored)

12 months

血管性血友病因子（vWF）是一种多聚体血浆糖蛋白，是正常止血血小板栓塞形成所需的（1-8）。成熟的血浆蛋白由明显相同的亚基（Mr = 260,000）组成，它们通过二硫键结合在一起。循环的vWF分子的大小范围从二聚体（Mr = 520,000）到极大的多聚体（Mr> 10,000,000）。在正常止血期间，较大的vWF多聚体负责通过在血小板内糖蛋白IB和内皮下的暴露胶原之间形成桥接来促进血小板栓的形成（9-14）。缺乏vWF蛋白或存在导致聚合减少的异常可能导致生物活性丧失，这是冯维勒布兰德氏病的特征。

除了其在血小板栓塞形成中的作用外，vWF还负责血浆中因子VIII（抗血友病因子）的结合和转运（15）。似乎后一事件是功能性因子VIII的稳定性和有效递送的原因。研究表明，因子VIII与成熟vWF亚基的NH2末端部分结合，每个vWF单体具有一个因子VIII分子的化学计量（16,17）。

单链vWF单体在NH 2 – 末端和COOH – 末端都含有大量半胱氨酸残基，其参与多聚体形成。碳水化合物分析表明，近15％的vWF质量是由碳水化合物贡献的（18）。似乎碳水化合物用于保护vWF免于蛋白水解，但对于功能活性或多聚体形成不是必需的。

使用Thorell（19）和Lollar（20）描述的方法的组合，从柠檬酸盐人血浆制备vWF。还可获得因子VIII“游离”vWF制剂，其进一步纯化以确保去除因子VIII促凝血活性（仍存在抗原）。通过在还原条件下的SDS-PAGE判断，制剂纯度> 95％，并且通过SDS /琼脂糖凝胶中的电泳测定由大的多聚体组成。将蛋白质在0.025M柠檬酸钠，0.1M甘氨酸，0.1M NaCl，pH6.8中冷冻运输，在-70℃下储存。

 

凝胶

Novex 4-12％Bis-Tris

加载

人类血管性血友病因子，每泳道1微克

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脱氢酶（51 kDa），酒精脱氢酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌红蛋白红（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的）

本地化/次>

血浆和内皮下

行动方式

通过在内皮下形成血小板糖蛋白IB和暴露的胶原之间的桥接来促进血小板栓的形成; 也绑定和运输因子VIII

分子量

260,000到> 10,000,000（1-8）

等电点

5.7-5.9（21）

消光系数

不适用; 通过总蛋白质测定确定浓度。

血浆浓度

10微克/毫升（21）

结构体

由相同的260,000个分子量亚基组成的多聚体蛋白质

碳水化合物百分比

约15％（18）

 

参考

  • Hoyer，LW，Blood，58,1（1981）。
  • Ruggeri，ZM和Zimmerman，TS，J。Clin。Invest。，65,1318（1980）。
  • Zimmerman，TS，et al。，Proc。国家科。科学院。科学。USA，72,5121（1975）。
  • Hoyer，LW和Shainoff，JR，Blood，55,1056（1980）。
  • Counts，RB，et al。，J.Clin。Invest。，62,702（1979）。
  • Perret，BA，et al。，Biochim。生物物理学。Acta，578,164（1979）。
  • Weinstein，M。和Deykin，D.，Blood，53,1095（1979）。
  • Meyer，D.，et al。，J.Lab。临床。Invest。，95,590（1980）。
  • Okumura，T。和Jameison，GA，Thromb。Res。，8,701（1976）。
  • Nachman，RL，et al。，J.Clin。Invest。，59，（1977）。
  • Jenkins，CSP等，J.Clin。Invest。，57,112（1976）。
  • Santoro，SA，Thromb。Res。，21,689（1981）。
  • Santoro，SA和Cowan，JF，Collagen Relat。Res。，2,31（1982）。
  • Morton，LF，et al。，Thromb。Res。，32,545（1983）。
  • Tuddenham，EGD，et al。，Br。J. Haematol。，52,259（1982）。
  • Foster，PA，et al。，J.Biol。Chem。，262,8443（1987）。
  • Parker，CG和Lollar，P.，J.Biol。Chem。，262,17572（1987）。
  • Federici，AB，et al。，J.Clin。Invest。，74,2049（1984）。
  • Thorell，L。和Blomback，B.，Thromb。Res。，35,431（1984）。
  • Lollar，P.，et al。，J.Biol。Chem。，263,10451（1988）。
  • Furlan，M.，Human Protein Data（A。Haeberli，ed。）©VCH Verlagsges，mbH，Weinheim

出版物

  • Garcia，A.，et al。，Blood。2005年11月15日; 106（10）：3410-3414。（纤维蛋白原受体激活）
  • Liu，J.，et al。，Blood。2005年10月15日; 106（8）：2750-2756。（VWF诱导的信号传导）
  • Pergolizzi，R.，Blood。2006年8月1日; 108（3）：862-869。（小鼠vWF病）

 

 

 

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