使用说明：
1. DEAE-Dextran常规转染方法
a. 细胞培养(以六孔板为例，其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作)：
在转染前一天(20-24小时)把约20-60万细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)培养到六孔板内，使第二天细胞能达到约40-70%满。
b. 混匀试剂盒中各试剂。取适量10XPBS，稀释为1XPBS。37℃预热自备洗涤液(PBS或HBSS)。
c. 参考下表，对于待转染的六孔板中一个孔的细胞，依次加入适量1XPBS，2μg DNA，以及8μl DEAE-Dextran溶液，使最终体积为170μl，用枪轻轻吹打混匀。
注意：不宜Vortex或离心。

注1：对于六孔板中一个孔的细胞，DNA用量可以在1-3μg的范围内进行适当调节。最佳的转染条件，因具体的细胞和培养条件而定，可以在上述推荐范围内自行优化转染条件。
注2：对于其它培养板或培养器皿，各种试剂的用量可以大致按照细胞培养面积按比例进行换算。
d. 去除细胞培养液，用PBS洗涤细胞2-3次，吸除残留液体。
e. 把170μl DEAE-Dextran-DNA混合物均匀滴加到细胞表面。
f. 细胞培养箱内孵育30分钟，孵育期间经常摇动培养板以保持所有细胞湿润。
g. 参考上表，每孔缓慢加入1.7ml细胞培养液(约DEAE-Dextran-DNA混合物体积的10倍)。
h. 选做：参考上表，每孔加入17μl氯喹溶液。氯喹溶液可以和上一步骤中1.7ml细胞培养液预先混合后一起加入。 i. 细胞培养箱内培养不超过2.5小时或在出现明显的细胞毒性前，更换新鲜细胞培养液继续培养。
j. 通常转染后48-72小时可以检测转染效果。
2. DEAE-Dextran预处理转染方法
a. 细胞培养(以六孔板为例，其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作)：
在转染前一天(20-24小时)把约20-60万细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)培养到六孔板内，使第二天细胞能达到约40-70%满。
b. 混匀试剂盒中各试剂。取适量10XPBS，稀释为1XPBS。37℃预热自备洗涤液(PBS或HBSS)。
c. 参考下表，取适量试剂盒中提供的DEAE-Dextran溶液用1XPBS稀释10倍。对于六孔板的一个孔，取0.1ml DEAE-Dextran溶液，加入0.9ml 1XPBS，混匀。
d. 参考下表，取适量DNA用1XPBS稀释。对于六孔板的一个孔，取2μg DNA，加入适量1XPBS使最终体积为162μl。

注1：对于六孔板中一个孔的细胞，DNA用量可以在1-3μg的范围内进行适当调节。最佳的转染条件，因具体的细胞和培养条件而定，可以在上述推荐范围内自行优化转染条件。
注2：对于其它培养板或培养器皿，各种试剂的用量可以大致按照细胞培养面积按比例进行换算。
e. 去除细胞培养液，用PBS或HBSS室温洗涤两次，每次3-5分钟。
f. 去除洗涤液，加入1ml经10倍稀释的DEAE-Dextran溶液，室温孵育9分钟。
g. 去除稀释的DEAE-Dextran溶液，用PBS或HBSS轻轻洗涤细胞两次。洗涤时要特别小心，经DEAE-Dextran预处理后贴壁细胞容易脱落。
h. 去除洗涤液，把步骤2d准备的162μl含有2μg DNA的1XPBS溶液，均匀滴加到细胞表面。
i. 细胞培养箱内孵育30分钟，孵育期间经常摇动培养板以保持所有细胞湿润。
j. 参考上表，每孔缓慢加入1.7ml细胞培养液(约稀释的DNA体积的10倍)。
k. 选做：参考上表，每孔加入17μl氯喹溶液。氯喹溶液可以和上一步骤中1.7ml细胞培养液预先混合后一起加入。加入氯喹后，
在4小时内或出现明显的细胞毒性前必须更换新鲜细胞培养液。氯喹的具体处理时间，对于不同的细胞需根据实验操作结果进行确认。
l. 通常转染后48-72小时可以检测转染效果。
常见问题：
1. 转染效率低或几乎没有转染。
很多时候是由于过多细胞死亡导致。可以考虑适当减少DEAE-Dextran溶液的用量，或适当缩短细胞暴露于DEAE-Dextran的时间；减少氯喹溶液的处理时间；一些对DEAE-Dextran特别敏感的细胞，在转染时可以适当增加细胞密度。优化DNA的用量通常可以获得较高的转染效率。另外，确保DNA的纯度，例如确保A260/A280>1.8，可以改善转染效率。
2. 转染效率不稳定。
如果有支原体污染通常会导致转染效率不稳定，此时只需更换没有污染的细胞就可以了。另外，细胞生长状态不佳，也容易导致转染效率显著下降。