总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(Total Glutathione Peroxidase Assay Kit)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase)活性的试剂盒。绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中性组成部分。细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。本试剂盒可以定量检测出最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶和少量不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶的总量。
      本试剂盒如果和谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(S0056)配合使用，可以定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
      谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用。细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。
      谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。如果以过氧化氢为底物进行检测，则同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。本试剂盒利用了一种间接测定的方法。谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG，而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。在上述反应中谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
      本试剂盒利用了如下的反应原理，GPx为谷胱甘肽过氧化物酶，GR为谷胱甘肽还原酶，R-OOH为过氧化物。

      本试剂盒提供的有机过氧化物试剂(Cum-OOH)在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应，也不会被细胞内的过氧化氢酶催化而分解。因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。
      有机过氧化物试剂(Cum-OOH)不仅可以作为含硒的谷胱甘肽过氧化物酶的底物，也可作为不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶的底物，因此本试剂盒可以定量检测总谷胱甘肽过氧化物酶。
      可检测组织匀浆产物、细胞裂解产物等样品中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。一个试剂盒可进行100次检测。
包装清单：

保存条件：
       -20℃保存，一年有效。NADPH溶解后宜-70℃保存，4℃可以保存一天，-20℃保存一周后NADPH会减少10%以上。GSH在配制成溶液后，适当分装，-20℃保存。
注意事项：
      本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。如果在样品中的还原剂无法避免，例如DTT、巯基乙醇等，则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
      常用的Triton X-100、Tween 20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，会影响本试剂盒的测定。如果必须使用这些去垢剂，最好使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
      为消除样品中可能含有的可以消耗NADPH的酶的干扰，可以检测不加过氧化物试剂的样品作为对照。
      样品可以立即测定，也可以-70℃冻存待以后测定。
      一定要严格控制反应时的温度，否则会引起较多误差。
      NADPH不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明

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Caspase 4活性检测试剂盒(Caspase 4 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 4酶活性或纯化的caspase 4酶活性的试剂盒。
Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 4有时被写作caspase-4或caspase 4，可以和Apaf-1相互作用并参与细胞色素c导致的caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。
本Caspase 4活性检测试剂盒是基于caspase 4可以催化底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 4的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 4催化产生的黄色产物pNA，可以作为定量caspase 4酶活性的标准品。
本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以检测100个样品。
包装清单：

保存条件：
-20℃保存，Ac-LEVD-pNA和pNA需避光保存。
注意事项：
须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405，如有困难可以测定A400。
Ac-LEVD-pNA需尽量避免反复冻融，请注意适当分装。
测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)，可向上海金畔生物科技有限公司订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度，以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
pNA(中文名为4-硝基苯胺)对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
本试剂盒的裂解液可以和上海金畔生物科技有限公司生产的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用，即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于上海金畔生物科技有限公司其它caspase活性检测试剂盒的检测。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

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      Taq DNA Polymerase简称Taq酶，是最常用的DNA聚合酶之一。
      Taq DNA Polymerase是一种来源于嗜热菌Thermus aquaticus的高度热稳定的DNA聚合酶，95℃孵育时的半衰期大于40分钟。Taq酶的分子量为94 kDa。Taq酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。Taq酶没有3’至5’的外切酶活性，有非常低的5’至3’外切酶活性。由于Taq酶没有3’至5’的外切酶活性，因此在DNA聚合过程中相当于核苷酸转移酶的作用，最终会导致PCR产物的3’末端会产生3′-dA overhangs，即产生带一个A的3’粘端。
      来源：本Taq DNA Polymerase为recombinant Taq DNA Polymerase，通过大肠杆菌表达纯化获得，和纯化获得的天然
Taq DNA Polymerase在各方面的性质相同。
      用途：PCR、DNA标记和测序等。
      本Taq酶可以扩增长度达5 kb的DNA片段，最长可以扩增长达8kb的DNA片段。通常适合扩增3kb以下的DNA片段。
      用本Taq酶扩增产生的PCR产物带有3′-dA overhangs，可以用于基于T载体的PCR片段克隆。
      PCR反应过程中可以掺入生物素、地高辛或一些荧光机团标记的脱氧核苷酸，即可以用核酸的标记反应。
      本Taq酶除用于各种PCR扩增以及DNA标记外，还可以用于DNA测序。
      活性定义：One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 70℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 67 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 6.7 mM MgCl₂, 1 mM 2-mercaptoethanol, 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [³H]dTTP。
      纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。
      酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Nonidet P40, 0.5% (v/v)
Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
      10X PCR Buffer (with Mg²⁺)：100 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 500 mM KCl, 15mM MgCl₂, 0.8% (v/v) Nonidet
P40。
      失活或抑制：酚氯仿抽提可以使Taq酶失活，加入脱氧胆酸钠至0.06%，SDS至0.01%，或sarkosyl至0.02%均可以抑制Taq酶。
      本产品用于50微升的PCR反应体系，足够用于160个反应；用于20微升的PCR反应体系，足够用于400个反应。
包装清单：

保存条件：
      -20℃保存。
注意事项：
      由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
      Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10^-5，对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶，例如Pfu DNA polymerase、BeyoTaq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测，Taq DNA polymerase是最佳选择。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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Enhanced Cell Counting Kit-8，简称增强型CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒，比普通的CCK-8试剂盒具有更好的检测灵敏度和更宽的线性范围。
WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的
formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

图1. WST-8检测原理图 (EC=electron coupling reagent，即电子耦合试剂)

WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。
WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。
本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的增强型CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
WST-8对细胞无明显毒性。加入增强型CCK-8溶液显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
上海金畔生物科技有限公司各种细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择，请参考http://www.beyotime.com/cell-proliferation.htm。
本试剂盒可以测定100个样品。
包装清单：

保存条件：
4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存两年有效。
注意事项：
由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测，如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。
用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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      TCEP即TCEP-HCl，全称Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride，中文名为三(2-羧乙基)膦盐酸盐。分子式为C₉H₁₅O₆P·HCl，分子量为286.65，CAS号51805-45-9。本产品为0.5M TCEP溶液，用NaOH调节pH值至6.8，常作为DTT的替代物用于蛋白上样缓冲液和其它还原试剂的配制。

图1. TCEP-HCl的化学结构式。

      TCEP是一种高效、无异味、不含硫醇基的水溶性还原剂，可选择性还原多肽或蛋白质中的二硫键。TCEP具有更佳的稳定性、更广的兼容性、更强的还原性、更好的选择性，而且由于不含巯基，因此在多数应用中不必去除，从而广泛应用于生物化学和分子生物学中，特别是在蛋白质化学、蛋白质组学中，是公认的DTT的良好替代物。
      TCEP对还原二硫键选择性极强，除半胱氨酸外，几乎不会与其它氨基酸有反应，并且能在更宽的pH值范围包括酸性条件下使用，从而有效减少酰胺键的水解。TCEP的反应活性温和、易溶、毒性小，且更容易操作，在酸性、碱性溶液中的稳定性都很好。
      TCEP使用范围广泛，无论是普通的SDS-PAGE中蛋白的还原，还是一些特殊的实验如固相金属离子亲和层析(IMAC)、质谱、Ni柱纯化等其它需要还原二硫键的实验，也特别适用于组氨酸标记蛋白纯化、马来酰亚胺偶联半胱氨酸残基反应，它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键，但不像DTT或β-巯基乙醇本身易与马来酰亚胺反应。
      TCEP的特点有：无气味——与DTT和β-巯基乙醇不同，TCEP是无异味的，有助于创造更加健康的实验室环境；高效——5到50mM 的TCEP在数分钟内即可完全还原大多数多肽或蛋白的二硫键(与DTT等效)；特异性——选择性的完全还原甚至最稳定水溶液中的烷基化二硫键；快速——在室温和pH5的条件下，不到五分钟即可还原蛋白的二硫键；稳定——耐空气氧化，无挥发性，与蛋白的其它功能基团不反应；通用性——可在广泛pH范围、盐、去垢剂、温度条件下还原多肽和蛋白；兼容性——不含巯基，因此在多数应用中不必去除还原试剂。
      TCEP与DTT主要特点的比较表格如下：

      在SDS-PAGE电泳中，一般终浓度在25mM左右的TCEP即可足够还原蛋白样品。也可直接使用上海金畔生物科技有限公司各类含TCEP的无气味的蛋白上样缓冲液(P0282、P0286、P0287、P0288、P0289、P0292)。
包装清单：

保存条件：
      -20℃或4℃保存，至少1年有效。
注意事项：
      本产品在磷酸盐缓冲液中，尤其在中性或碱性磷酸盐缓冲液中很不稳定。因此若实验过程需将本产品配制在PBS缓冲液中使用，必须现配现用。
      大多数蛋白无需变性剂即可高效还原，但加入盐酸胍等变性剂有助于将内部二硫键暴露而易于和TCEP发生反应。
      不建议使用尿素作为变性剂，避免形成氰酸酯并与巯基反应。
      尽量防止金属接触TCEP溶液，否则会一定程度降低TCEP活性。在还原过程中向样品缓冲液中加入5至20mM EDTA有助于防止巯基被二价金属离子氧化，如Zn²⁺、Cu²⁺和Mg²⁺等。
      还原后样品应尽快使用，长时间放置后会重新生成二硫化物。
      本产品在溶液中带电荷，因此不适用于等电聚焦(IEF)实验。
      TCEP对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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