热启动型 Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

产品详情

产品描述

本酶为 HotStart Taq DNA 聚合酶，需 95 度加热 5 分钟或 98 度加热 2 分钟而激活。Taq DNA 聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌 Thermus aquaticus 来源的热稳定型 DNA 聚合酶，分子量为 94 kDa。本酶经特殊改造，具有良好扩增能力和延伸速度，扩增片段的长度可达 5-6 kb，延伸速度为 2-3 kb/ min（72℃）。该酶具有 5’→3’聚合酶活性，较弱的 5’→3’外切酶活性；无 3’→5’ 外切酶活性。扩增产物具有 3'-dA 尾巴。

产品应用

1、热启动 PCR 扩增

2、Multiplex PCR

3、菌落PCR

4、TA 克隆 PCR 产物添加 3’-dA

5、DNA 荧光标记

活性定义

以大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 72℃、30 min 内，将 10 nmole 脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR 方法检测无宿主残余 DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20 度。

运输与保存

干冰运输。-20℃保存，有效期2年。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作！

本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

备注

1、本酶为热启动 Taq DNA 聚合酶，需 95 度加热 5 分钟或 98 度加热 2 分钟而激活；因此有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体，得到良好的PCR 结果。

2、Taq DNA 聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在 PCR 产物 3’末端通常会加上 1 个多余的腺嘌呤。

3、对非热启动酶而言，建议在冰上配置 PCR 反应液后，再放入 PCR 仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR 结果。

4、碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq DNA 聚合酶的碱基错误率为 1×10-5。

5、如进行 PCR 扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议提高退火温度，或进行梯度退火， 确定最佳退火温度；同时可以适当减少体系中的 Taq 酶用量，以增加 PCR 扩增反应的特异性。

6、本公司 Buffer 经大量 PCR 反应实例优化而成，然而对某些PCR 反应存在一个良好的镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的 buffer 和 MgCl2/MgSO4。