DiD (细胞膜远红外荧光探针)

DiD (细胞膜远红外荧光探针)

¥380.00

货号:BL926A

规格:10mg

品牌:Jinpan

产品简介:

DiDDiODiIDiR染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI色荧光),DiO(绿色荧光),DiD荧光)和 DiR (深红色荧光),这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。

DiDDiI的类似物,但具有更长的激发和发射波长,为远红外荧光,在一些细胞和组织染色中更有优势,特别适合用于进行多种荧光的同时染色。DiD可被633nm的氦氖激光所激发,DiD在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiD被激发后可以发出远红外的荧光,最大激发波长为644nm,最大发射波长为663nm

DiD被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

DiD染色后可以兼容免疫荧光实验。建议使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黄皂苷配制的不会溶解细胞膜的通透液进行通透,其它去垢剂配制的通透液可能会溶解细胞膜上的脂类物质,造成DiD失去结合位置,最终导致DiD的染色失效。但通透也可能会影响DiD在细胞膜上的定位并会增加细胞内的染色,具体实验中需根据实验的需求选择合适的细胞通透液。

 

产品信息:

英文名:DiIC18(5); 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate

分子式:C61H99ClN2O4

分子量:959.91

纯度:≥95%

 

使用方法仅供参考

一、DiD细胞膜染色液制备

1.配置DMSOEtOH 储存液:用DMSOEtOH配置浓度1-5 mM的储存液

2.工作液制备:用合适的缓冲液(如无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 µM的工作液。

注:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制,可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。  

二、细胞染色

a.对于悬浮细胞

1.悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。

2.37℃培养细胞520分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

3.10001500rpm离心5分钟。

4.去除上清,再次缓慢加入37℃预温的培养液。

5.重复步骤34,两次以上。

b.对于贴壁细胞

1.去多余的培养液。

2.加入染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

3.37 ℃培养细胞 520分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

4.染料工作液,用培养液清洗23次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养510分钟,然后吸干培养基。

结果分析

显微镜下观察或流式细胞仪检测

 

注意事项

1、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃干燥避光保存,有效期一年。

货号 BL926A
规格 10mg
品牌 Jinpan
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