angioproteomie cAP-0010说明书
人视网膜微血管内皮细胞
Human Retinal Microvascular Endothelial Cells
Item#:
cAP-0010
| Size | Price |
|---|---|
| 1.0 Frozen Vial | $600.00 |
| 订单信息 | |
| 产品名称 | 人视网膜微血管内皮细胞（HRMVEC） |
| 目录号 | cAP-0010 |
| 产品格式 | 冷冻瓶 |
| 细胞数量 | > 5×10 [5]个细胞/小瓶 |
| 一般信息HRMVEC（cAP-0010）细胞是从正常人视网膜组织中分离出来的。将细胞装在冷冻小瓶中（第3代提供细胞）。推荐使用内皮细胞生长培养基（EGM，包含10％的血清和生长补充剂，cAP-02）进行细胞培养，按照以下详细方案进行培养时，这些细胞的小平均群体倍增水平> 20。 | |
| 细胞的表征 | |
| 1. | 细胞质VWF /因子VIII免疫荧光阳性> 95％ |
| 2. | 免疫荧光检测Di-I-Ac-LDL细胞质摄取> 95％阳性 |
| 3. | 细胞质PECAM1免疫荧光阳性> 95％ |
| 4. | HRMVEC对HIV-1，HBV，HCV和支原体呈阴性 |
| 产品使用情况单元仅供研究使用。 | |
| 用干冰包装运输冷冻瓶。 | |
| 到达细胞的处理当您收到装有冷冻小瓶中的细胞的干冰包装时，请将冷冻小瓶中的细胞转移到-80C冷冻室中进行短期保存，或者将其移入液氮罐中进行长期保存。 | |
| 解冻细胞和亚培养的协议 | |
| a） | T25烧瓶的预涂-将2ml快速涂层溶液（cAP-01）加入T25烧瓶中，以覆盖烧瓶的整个表面，5分钟后，通过抽吸处理过量的涂层溶液，准备使用烧瓶（尽管可以使用包含其他细胞外基质（即明胶，胶原蛋白和纤连蛋白）的溶液，但请确保事先优化条件）。 |
| B） | 首先在37°C水浴中解冻冷冻的细胞瓶，然后将细胞转移到装有10ml cAP-02培养基的预涂T25烧瓶中，细胞通常会汇合过夜，并准备进行传代。 |
| C） | 要传代细胞，请在T25烧瓶中用5ml HBSS（RT）冲洗两次。然后将2ml胰蛋白酶/ EDTA（RT）（cAP-23）加入一个T25烧瓶中；吸出后在20秒内轻轻处置过量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。 |
| D） | 将T25烧瓶中的细胞在室温或37°C下放置1分钟（大多数细胞通常会在1-2分钟内从表面分离；或在显微镜下监控细胞，直到大多数细胞被聚集起来，然后轻轻敲击烧瓶）靠在工作台表面上，在显微镜下监控时，细胞会在烧瓶表面上移动。 |
| E） | 加入5ml胰蛋白酶中和缓冲液，并通过800g离心5分钟使细胞旋转。 |
| G） | 用10或15ml cAP-2培养基重悬细胞沉淀，然后将5 ml分别转移到2或3个预涂的T25烧瓶中（对于1/2至1/3的继代培养比例）。 |
| H） | 每2或3天更换培养基，通常在7天内（当以1/3的比例分裂时）融合细胞。 |
| I） | 要准备静态细胞，当细胞几乎汇合时，请在实验前约8-12小时用含有0.5％FBS的内皮基础培养基（EBM，cAP-03）代替cAP-02。 |