thenativeantigen CMV-PENT-50说明书

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巨细胞病毒 gH 五聚体复合物

重组人巨细胞病毒五聚体蛋白复合物,由 gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A 蛋白组成,在哺乳动物 HEK293 细胞中产生,纯度高于 95%。该复合物已在 ELISA 中显示与我们的重组NRP-2蛋白结合。


SKU:CMV-PENT-50 

类:抗原和抗体, CMV 抗原 

标签:巨细胞病毒 gH 五聚体


SDS-PAGE:考马斯染色的 SDS-PAGE,显示巨细胞病毒 gH 五聚体复合物。

直接ELISA:板用1000ng、100ng、10ng或1ng NRP-2包被并用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚体或 gB huFc-tag 进行探测,然后在室温下封闭 1 小时。在室温下,用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚体或 gB huFc-tag 对板进行探测 2 小时。对于一抗,绵羊抗 gH 五聚体血清以 1:2,000 使用,小鼠抗 His-tag 抗体以 1:1,200 使用(对于 ZIKV-NS1),gB 不使用一抗。二抗 STAR88P 用于 gH 五聚体,浓度为 1:2,000;STAR147P 用于通过 Fc-tag 以 1:2,000 检测 gB huFc-tag,Biorad 105300 用于以 1:2,000 检测 ZIKV-NS1。所有二次孵育均在室温下进行 45 分钟。使用 TMB 膜底物 (KPL) 进行检测 40 分钟。使用 1M HCl 终止反应。测定证实 NRP-2 与 gH 五聚体特异性结合,但不与 gB 或 ZIKV NS1 结合。



巨细胞病毒GH五聚体复合物

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物包含五种病毒蛋白(gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A)。该复合物已在 ELISA 中显示与我们的重组NRP-2蛋白结合。

 

产品详情 – 巨细胞病毒 gH 五聚体复合物

  • 重组人巨细胞病毒五聚体蛋白复合物(菌株 VR1814),由蛋白 UL75 (gH)、UL115 (gL)、UL128、UL130 和 UL131A 组成。

  • gH 蛋白含有一个 C 末端的 His 标签,并在 HEK293 细胞中重组产生。

  • 在 Dulbecco 的 PBS 中呈现,0.2µm 过滤器已灭菌。

  • 在 ELISA 中纯化的蛋白质与 NRP-2 受体结合。

  • NCBI 登录代码:ACZ79986。

 

背景

hCMV 可导致免疫受损个体(如移植受者和 HIV 患者)的严重发病/死亡,而先天性 hCMV 感染可导致出生缺陷。

五聚体复合物在所有野生型 hCMV 毒株上均有表达,但在 AD169 等实验室毒株中明显缺失。弗里德等人)。这严重限制了疫苗的开发。受体介导的病毒进入内皮细胞需要功能性的 gH 五聚体复合物,而这种复合物是感染个体中抗病毒抗体的主要靶标之一。NAC 的新型重组 hCMV gH 复合物将是实现必要的基础和应用研究的关键。此外,gH 复合物有望为新一代体外诊断检测提供基础。

类似天然的五聚体复合物在人体细胞中产生,以确保所有蛋白质都正确折叠并具有其天然糖基化模式。通过质谱确认纯化复合物中所有五种蛋白质的存在。五聚体复合物以即用型液体形式提供,提供 100ug 和 1mg 小瓶大小,有机会批量购买。

NAC 在其 CMV 系列中提供另外两种抗原:一种天然高纯度抗原,对 IgG 和 IgM 均表现出高亲和力,是抗体捕获测定的理想选择,另一种更适合作为血清学对照的标准裂解物。

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物作为目录项目出售,仅用于研究用途和体外诊断测定/试剂盒,因此无需事先与 NAC 达成协议。如果产品旨在用作药物或作为生产药物的手段(包括用作免疫原和用于临床试验),则必须事先与 NAC 签订合同协议。

 

参考

  • 弗里德等人。(2013)。Proc Natl Acad Sci 美国 A.110(51)。

 

cellero CMV抗原说明书

 

我们的召回抗原可用于评估供体的免疫反应。我们还提供用于抗原特异性 T 细胞的肽。使用我们的 PBMC 测试所有抗原的生物活性

 

cellero CMV抗原说明书

CMV抗原

# 1004
尺寸: 100 微克/瓶

捐助者详情

抗凝物 : 未知

附加产品信息:

通过在蔗糖梯度上离心,从 CMV 感染的人成纤维细胞的培养物中富集 CMV 抗原。存在多种病毒蛋白。

抗原产品是蛋白质和病毒裂解物,可刺激对抗原敏感的所有供体的体外免疫反应。这消除了选择优势肽或蛋白质的可能性,允许您对所有供体使用一种抗原。

大多数美国人口都接种了破伤风类毒素,30-40% 的人口巨细胞病毒 (CMV) 呈阳性,这使得这两种抗原成为召回分析的理想选择。

我们提供各种抗原来刺激细胞,所有抗原均使用我们的 PBMC 进行生物活性测试。我们的三种回忆抗原可用于研究不同类型的免疫记忆:巨细胞病毒 (CMV)、破伤风和 M1。

CMV 抗原:CMV 抗原激活 PBMC 通常表明供体对 CMV 呈血清阳性,尽管我们已经观察到来自血清阴性供体的 PBMC 刺激。CMV 建立潜伏感染,并被健康 CMV 阳性供体的免疫系统控制。这导致相对大量的 CMV 反应性 T 淋巴细胞,CD4+ 和 CD8+。

破伤风抗原:破伤风抗原与明矾复合,但能很好地刺激 PBMC 增殖。大多数人接种了这种抗原,因此对它有免疫反应。反应的程度因捐赠者而异,这取决于他们的免疫状态、年龄和自上次接种破伤风疫苗以来的时间。由于明矾的存在,该制剂可能不适合用于体外免疫反应以外的用途。

M1 抗原: M1 肽是流感病毒的免疫优势表位,但仅适用于表达 HLA-A*0201 的供体。我们已经观察到对这种抗原制剂的反应性,但仅在 7-10 天的培养期之后。与 CMV 不同,流感病毒在感染后会从体内清除,因此感染后对抗原的免疫反应减弱。这种抗原只会刺激 CD8+ T 细胞,而不是 CD4+ T 细胞。

当我们将抗原特异性 T 细胞添加到我们的目录时,我们也添加了它们的同源肽抗原。

 

pTracer CMV2载体说明书

 

pTracer CMV2

型号 载体名称 出品公司 载体用途
VPI0016 pTracer CMV2 Invitrogen 哺乳动物表达载体
产品参数: 

Mammalian Selection:Zeocin
Marker:GFP

载体抗性: 
氨苄青霉素(Ampicillin)
载体描述: 

这是一个双表达框载体,CMV启动子后有MCS供插入外源基因,hEF1α启动子调控Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion的表达,可以做到既有荧光蛋白来做转染指示,且荧光基因表达和外源基因表达又不会互相干扰,而且Zeocin也可以用来做稳定性细胞筛选。另外,由于EM-7启动子的存在,Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion在E.coli中也可以表达,可以用来做原核荧光定位。

Three pTracer™ mammalian expression vectors are available that express GFP fused to the selectable marker Zeocin™ . Each vector uses a different set of promoters to express the gene of interest and the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion.

All three pTracer™ vectors have the following features:

  • Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion for selection in mammalian cell lines
  • BGH polyA signal and transcription termination sequences to enhance mRNA stability

The pTracer™-SV40 vector offers:

  • SV40 promoter for high-level constitutive expression of your gene of interest
  • CMV promoter for high-level constitutive expression of the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion
  • SV40 origin for episomal replication and simple vector rescue in cell lines expressing the SV40 large T antigen

The pTracer™-CMV2 vector offers:

  • CMV promoter for high-level constitutive expression of your gene of interest
  • EF-1α promoter for high-level constitutive expression of the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion
  • Ampicillin resistance gene for selection in E. coli

The pTracer™-EF vectors offer:

  • EF-1α promoter for high-level constitutive expression of your gene of interest
  • CMV promoter for high-level constitutive expression of the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion
  • C-terminal V5 epitope tag for simple detection of recombinant fusion proteins with an Anti-V5 Antibody
  • C-terminal 6xHis tag for rapid purification on nickel-chelating resin and simple detection with an Anti-His(C-term) Antibody
  • Multiple cloning site supplied in three reading frames to simplify cloning in frame with the C-terminal tag
质粒图谱: 

pSilencer 4.1-CMV puro载体说明书

 

pSilencer 4.1-CMV puro

载体描述: 

The pSilencer 4.1-CMV siRNA Expression vectors are linearized with both BamH 1 and Hind III to facilitate directional cloning. They are also purified to remove the digested insert so that it cannot re-ligate with the vector. This greatly increases the percentage of clones bearing the hairpin siRNA template insert after ligation, reducing the time and effort required to screen clones.

质粒图谱: