haemtech荧光底物产品简介
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基于ANSN的植物底物
的一般结构举例说明了基于6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)的荧光底物的一般结构。在本化合物家族中,R 1是三肽,其COOH-末端残基通常是精氨酸。R 2和R 3可以是氢,烷基,芳基或环烷基。虚线表示各种丝氨酸蛋白酶的水解位点。
包含荧光报告基团6-氨基-1-萘-磺酰胺(ANSN)的底物是用于监测各种丝氨酸蛋白酶(1-12)的酶活性的有用化合物。在这类化合物中,ANSN报告基团(在R1位置)连接至短三肽序列。设计肽序列以优化酶和底物之间的相互作用。可以添加到R2和R3位置的其他组分反映了P'亚位位置的变化,并且通常影响底物的动力学参数。有效底物的化合物在三肽和ANSN基团之间水解。一旦从肽部分上切下,ANSN基团的相对荧光显示出约1000倍的增加。
下一页确定的动力学性质将有助于选择合适的底物。事实证明,ANSN底物对因子VIIa(1-5,7,9,10,12)的分析特别有用。尽管仅因子VIIa的底物水解速率相对较慢,但将组织因子掺入测定系统后,几种化合物(例如化合物SN-17a)的kcat表现出较大变化。
使用信息:
基于ANSN的底物在DMSO中以10mM储备液的形式提供,通常可用于分析浓度范围为400 nM至低至50pM的酶。ANSN底物通常以50至100 µM的最终浓度使用,并可以在大多数生理缓冲液(即TBS,HBS,PBS等)中稀释至该最终浓度。反应(荧光的相对变化)可以使用标准荧光计或荧光板读数器进行监测。可以将仪器设置在以下波长下使用动力学或终点模式(激发= 352nm,发射= 470nm)。通过在发射光束中使用390至450 nm长通截止滤光片,可以大程度地减少光伪影。
下表列出了每种底物的动力学性质,表格下方包括了一些期刊参考文献以供使用。
DMSO中的底物储备溶液应在4°C或更低的温度下冷冻保存,并应避光。在这些条件下,这些化合物将保持稳定超过一年。
**下表的关键字:K m = µM;k cat = s -1 ; k cat / K m = M -1 s -1 x 10 -5 ; ND =未确定
-
结构 |
D-AFK-ANSNH-iC 4 H 9 .2HBr |
对…有用 |
对纤溶酶有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
130 |
钾猫 |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
3.7 |
钾猫/ K M |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
ND |
0.28 |
-
结构 |
Mes-D-LGR-ANSN(C 2 H 5)2 |
对…有用 |
对因子Xa有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
31 |
180 |
200 |
125 |
580 |
113 |
ND |
ND |
钾猫 |
0.63 |
0.007 |
0.79 |
36 |
15 |
0.055 |
ND |
ND |
钾猫/ K M |
0.2 |
ND |
0.04 |
2.9 |
0.26 |
0.005 |
ND |
ND |
-
结构 |
D-LPR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HCl |
对…有用 |
对因子XIa有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
0.5 |
300 |
300 |
171 |
75 |
45 |
98 |
ND |
钾猫 |
19 |
0.07 |
4.5 |
3.3 |
53 |
52 |
0.31 |
ND |
钾猫/ K M |
380 |
0.002 |
0.15 |
0.19 |
7.1 |
12 |
0.03 |
ND |
-
结构 |
D-FPR-ANSNH-C 6 H 11 •2 HCl |
对…有用 |
对凝血酶和VIIa有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
0.4 |
150 |
330 |
150 |
ND |
7.8 |
36 |
ND |
钾猫 |
17 |
0.05 |
8.4 |
0.32 |
ND |
6.6 |
0.074 |
ND |
钾猫/ K M |
430 |
0.004 |
0.25 |
0.02 |
ND |
8.6 |
0.02 |
ND |
-
结构 |
D-FPR-ANSNH-C 4 H 9 •2 HCl |
对…有用 |
对因子VIIa有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
ND |
186 |
102 |
ND |
ND |
53 |
ND |
ND |
钾猫 |
ND |
0.11 |
2.7 |
ND |
ND |
21岁 |
ND |
ND |
钾猫/ K M |
ND |
0.006 |
0.26 |
ND |
ND |
4 |
ND |
ND |
-
结构 |
Boc-L-(pF)FPR-ANSNH-C 2 H 5 |
对…有用 |
对tPA有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
3.7 |
50 |
217 |
ND |
ND |
ND |
71 |
ND |
钾猫 |
44 |
0.008 |
0.88 |
ND |
ND |
ND |
1.03 |
ND |
钾猫/ K M |
120 |
0.002 |
0.04 |
ND |
ND |
ND |
0.15 |
ND |
-
结构 |
Boc-L-FPR-ANSNH-C 2 H 5 |
对…有用 |
对凝血酶有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
17 |
ND |
ND |
100 |
ND |
540 |
47 |
ND |
钾猫 |
58 |
ND |
ND |
0.31 |
ND |
2.2 |
0.011 |
ND |
钾猫/ K M |
34 |
ND |
ND |
0.003 |
ND |
0.04 |
0.002 |
ND |
-
结构 |
L-EGR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HBr |
对…有用 |
对因子XIa有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
100 |
ND |
ND |
110 |
225 |
440 |
ND |
ND |
钾猫 |
2.5 |
ND |
ND |
0.2 |
82 |
17 |
ND |
ND |
钾猫/ K M |
0.25 |
ND |
ND |
0.02 |
3.6 |
0.39 |
ND |
ND |
-
结构 |
中银D-VLR-ANSNH-C 4 H 9 |
对…有用 |
对APC有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
19 |
42 |
170 |
19 |
ND |
3.9 |
ND |
ND |
钾猫 |
0.055 |
0.007 |
1.6 |
0.055 |
ND |
2.1 |
ND |
ND |
钾猫/ K M |
0.03 |
0.002 |
0.09 |
0.03 |
ND |
5.2 |
ND |
ND |
-
结构 |
D-VPR-ANSNH-C 4 H 9 •2 HCl |
对…有用 |
对凝血酶和aPC有用 |
动力学性质 |
a |
VIIa |
VIIa / TF |
a |
夏 |
电脑 |
吨PA |
纤溶酶 |
ķ中号 |
2个 |
89 |
52 |
160 |
520 |
54 |
110 |
ND |
钾猫 |
110 |
0.019 |
0.76 |
3.3 |
92 |
72 |
0.71 |
ND |
钾猫/ K M |
550 |
0.002 |
0.14 |
0.21 |
1.8 |
13 |
0.065 |
ND |