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BTXPRESS CYTOFUSION MEDIUM C, 500 ML VOLUME

btxpress细胞融合培养基,500 ML体积

Cytofusion®培养基旨在提率,同时在细胞融合过程中保持高细胞活力。专有混合; 无菌过滤,由的医疗级化学品制成。

产品 项目#  
BTXpress Cytofusion Medium C,500 ml体积 47-0001

 

 

BTXpressCytofusion®MediumC是一种先进的电融合缓冲液,专为杂交瘤生产而设计。低电导率缓冲液经过特殊配制,可大限度地减少电融合过程中细胞排列和加热过程中的细胞湍流,从而实现稳定的细胞融合效率和高细胞活力。

BTXpress Cytofusion Medium C从高质量的非动物医用级试剂中无菌过滤。它是许多商业生物技术和制药公司在其单克隆抗体发现的杂交瘤生成过程中的优选缓冲液。

特点与优势

  • 针对真核电融合应用进行了优化
  • 大的融合效率,高细胞活力
  • 稳定的细胞对齐环境
  • 导电率低,加热小 
  • 生理pH和均衡的渗透压
  • 不含动物产品

 建议使用

保持无菌环境。建议使用标准的无菌技术,以避免在使用过程中受到污染。

 

*,反复洗涤。BTXpress Cytofusion Medium C是一种低电导率培养基,专为电融合而设计。痕量的高电导率溶液如PBS或组织培养生长培养基可破坏融合过程。因此,在融合过程之前用BTXpress Cytofusion Medium C*清洗细胞是至关重要的。对于多5 x 10 7个细胞,建议在BTXpress Cytofusion培养基C中至少洗涤两次。对于超过5 x 10 7个细胞,建议至少洗涤三次。

*清洁电融合室。为避免其他离子污染源,每次使用后清洁电熔室,并用无菌去离子水*冲洗。 

室温电融合。为了大限度地提高细胞融合效率,请在室温下使用BTXpress Cytofusion Medium C. 终洗涤之前的细胞洗涤可以在4℃下进行。

大限度地减少缓冲区的时间。虽然Cytofusion Medium C是无毒的,但它不含有长期支持细胞活力的营养素。为了获得宜效果,大限度地缩短细胞悬浮在BTXpress Cytofusion培养基C中的时间。不建议细胞在终清洗后超过1小时保留在BTXpress Cytofusion Medium C中。

5:1直接稀释。电融合后,BTXpress Cytofusion培养基C中的细胞可以在细胞培养基中稀释而不洗涤细胞。建议将五份*培养基稀释至一份BTXpress Cytofusion Medium C的小稀释度。或者,可以在生长培养基中洗涤细胞以在培养之前*除去BTXpress Cytofusion培养基C.

存储信息

打开后储存在2-8°C。在-20°C至+ 50°C下短期储存(即运输)7天是可以接受的。内容可能在冻结后分开。如果冷冻,请在使用前充分混合。

警告和免责声明

如果缺少防篡改密封或瓶子损坏,请勿使用。瓶子损坏或故意篡改可能会导致本产品受到污染。使用前检查产品是否清晰。BTXpressCytofusion®培养基仅用于研究和研究目的。它不适合人类使用。根据OSHA危害通信标准29 CFR 1910.1200进行的评估,该产品不被视为危险品。

 

体积  500毫升
渗透压  270至290 mOsm / L.
电导率@ 25 o C.  0.080±0.005 mS / cm
pH值  7.2±0.2
内毒素  <0.25 EU / ml 
不育症  无菌过滤
存储  2至8 o C.
保质期  自生产之日起18个月

 

应用: 细胞融合

 

 

 

 

btxonline 47-0001说明书

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BTXPRESS CYTOFUSION MEDIUM C, 500 ML VOLUME

btxpress细胞融合培养基,500 ML体积

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Cytofusion®培养基旨在提率,同时在细胞融合过程中保持高细胞活力。专有混合; 无菌过滤,由的医疗级化学品制成。

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BTXpressCytofusion®MediumC是一种先进的电融合缓冲液,专为杂交瘤生产而设计。低电导率缓冲液经过特殊配制,可大限度地减少电融合过程中细胞排列和加热过程中的细胞湍流,从而实现稳定的细胞融合效率和高细胞活力。

BTXpress Cytofusion Medium C从高质量的非动物医用级试剂中无菌过滤。它是许多商业生物技术和制药公司在其单克隆抗体发现的杂交瘤生成过程中的优选缓冲液。

特点与优势

  • 针对真核电融合应用进行了优化

  • 大的融合效率,高细胞活力

  • 稳定的细胞对齐环境

  • 导电率低,加热小 

  • 生理pH和均衡的渗透压

  • 不含动物产品

建议使用

保持无菌环境。建议使用标准的无菌技术,以避免在使用过程中受到污染。

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btxonline PROTOCOL 0024说明书


btxonline PROTOCOL 0024说明书

PROTOCOL 0024

电解槽机械手ECM 600电穿孔协议
乳球菌亚种。乳酸菌LM0230
DNA:pGB301

ECM 630电协议

系统: ECM 630
细胞系): 乳酸乳球菌LM0230
转染子: 质粒,DNA,pGB301
引文: MyIntyre DA和Harlander SK,应用与环境微生物学,55(3):604-610,1989

 

电解槽机械手ECM 600电穿孔协议
乳球菌亚种。乳酸菌LM0230
DNA:pGB301
细胞准备:
生长培养基:M17 Glu或M17 Lac
温度:37摄氏度
电池密度:5 x 1010 CFU/ml
温度:冰镇
洗涤程序:颗粒5500 x g,4oC,10分钟
洗涤1:再次洗涤,10毫升无菌冷dd-H2O
颗粒1200 x g至4oC,10分钟
洗涤2:再次洗涤,10毫升无菌冷dd-H2O
颗粒1200 x g至4oC 15分钟
洗涤3:再次洗涤,1毫升无菌冷dd-H2O
4oC下颗粒大速度3分钟
终稀释:再次使用1.25毫升无菌冷dd-H2O
(等份可在冰上保存不超过两小时)

 

电穿孔设置:
选择方式:T 2.5kV/电阻高压(HV)
设置电容:C高压时默认设置为50μF
设置电阻:R5(129欧姆)
腔室间隙:BTX一次性反应杯P/N 610(1mm间隙)
BTX扁平封装室P/N 486(0.56 mm间隙)
设置充电电压:S如果使用1毫米,设置1.70千伏
如果使用0.56毫米,设置0.95千伏
估计场强:17千伏/厘米
期望脉冲长度:t 5毫秒
电穿孔程序:
样品体积:70μl
转染体积:0.003-0.94μg
工作温度:0oC-电穿孔前在冰上冷却装满反应杯
脉冲:按A启动自动充电和脉冲序列
稀释介质:M17-葡萄糖肉汤系列稀释液1:5,1:10,1:100
孵育:30oC,2小时
选择方法:M17-Glu琼脂上的抗生素选择板
结果:1 x 103
转化子/μg DNA
参考文献:MyIntyre DA and Harlander SK,应用与环境微生物学,55(3):604-610,1989(BTX ID#447)