工作液配制：
本品为 20µM 储存液，总量为 300µL。按照 100 nM 的工作液浓度来换算，可制备总量为 60 mL 的工作液。建议收到产品后，根据单次使用量分装保存，-20℃避光冻存，一年稳定。
实验前，用 1×PBS稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为：80~200nM（1:100-250 倍稀释），工作液现配现用。最佳稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。

染色步骤：
1. 细胞爬片生长 24h，使其密度达到 50%汇合度。
2. 吸掉培养液，37℃预热的 1×PBS（pH 7.4）清洗细胞 2 次。
3. 使用4%甲醛PBS溶液进行细胞固定，室温固定 10min。
注：避免固定剂中含有甲醇成分，因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4. 室温条件下，用 PBS 清洗细胞 2~3 次，每次 10min。
5. 室温条件下，用丙酮（≤-20℃）脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6. 室温条件下，用 PBS 清洗细胞 2~3 次，每次 10min。
7. 取 200µl 配制好的 FITC 标记鬼笔环肽工作液，覆盖住盖玻片上的细胞，室温避光孵育 30min（通常情况下，4℃~37℃ 孵育皆可）。
注：为了降低背景，可于 FITC 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA；另外，孵育过程中为了避免溶液挥发，可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8. 用 PBS 清洗盖玻片 3 次，每次 5min。
9. 用 200µl DAPI 溶液（浓度：100 nM）对细胞核进行复染，约 30s。
10. 用 PBS 清洗盖玻片，然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂，然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存，通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。
注：也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9. 10。
11. 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察，FITC（Ex/Em=496/516nm），DAPI（Ex/Em=364/454nm）。

注意事项：
1. 鬼笔环肽具有毒性，需小心操作（对人的半数致死剂量 LD50 约 2mg/kg）。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。