世界*实验材料供应商 ProQinase上海金畔生物为其中国代理， ProQinase在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， ProQinase就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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ProQinase是一家致力于为肿瘤蛋白激酶及肿瘤血管发生为治疗靶点的药物研发提供研发试剂及服务的高科技生物公司。ProQinase成立于2001年，是瑞士弗里堡肿瘤生物技术中心（欧洲zui大的私有肿瘤医院）的全资子公司。随着多年的成长， ProQinase已发展为拥有完整的蛋白激酶研究平台，致力于促进以肿瘤蛋白激酶为治疗靶点的新型药物研发工作，并加速新型药物在私有肿瘤医院的临床试验，是业内*的产品及技术供应商。ProQinase's 完善的蛋白激酶研究技术平台包括一个激酶研究试剂及临床前研究服务体系，包括一个zui大的重组蛋白激酶商品库，包括275个自主研发生产的催化活性蛋白激酶，11个脂质激酶和14个激酶底物，多供应产品共有396 个蛋白激酶及13个脂质激酶课用于激酶生化检测（HTS, 激酶选择性分析及确定激酶抑制剂的IC50)。除丰富的激酶研究产品线外，ProQinase还提供的以细胞检测、特定靶点的磷酸化检测及各种功能性细胞学检测（如迁移率检测、增殖检测、软琼脂检测及血管发生检测）。凭借PanQinase® Assay及先进的仪器设备，ProQinase提供的筛选服务有着zui短的响应时间及详尽的数据分析结果。此外，ProQinase 还提供细胞及体内检测系统服。目前，ProQinase已为前20强的药物公司中的17个公司提供药物研发产品或服务。

货号：0525-0000-1

品名：Recombinant Human Active  Protein Kinase（重组人活化蛋白激酶）

AXL Lot 003:考马斯染色           AXL Lot 003: ATP的 V max 和 Km 值的测定

产品的使用过程

1，缓冲液准备

标准检测缓冲液（2.5X储存）

–  125 mM  HEPES-NaOH, pH 7.5

–  7.5 mM  MgCl 2

–  7.5 mM  MnCl 2

–  7.5 µM  Na-orthovanadate

–  2.5 mM  DTT

激酶稀释缓冲液（10X储存）

–  500 mM  HEPES-NaOH, pH7.5

–  2.5 mg/ml PEG 20.000

–  10 mM  DTT

2，试验操作手册

在PP V底板上反应：

1）添加20ul标准检测缓冲液（2.5X储存）

2）添加5µL 10% DMSO (w, w/o test cpd)

3）添加10ul底物（到50mM HEPES PH 7.5中）

4）添加10ul重组蛋白激酶（到1X激酶稀释缓冲液中）

5）添加5ulATP（到水中）

6）混合振动筛

7）30°C孵育40 min

8）使用20µL 10% H ₃ PO ₄终止反应

9）用200µL 150 mm H ₃ PO ₄预湿过滤板（用20µL 100%乙醇先洗MSPH 过滤板）

10）转移反应液混合到过滤板上

11）培养至少10次，但每次不超过20分钟

12）真空过滤反应混合物

13）用200µL 150 mm H ₃ PO ₄洗涤3次

14）用20µL 100%乙醇洗涤1次

15）40°C干燥30分钟

16）每孔上添加50µL闪烁物

17）用闪烁计数器计数

产品链接：https://www.proqinase.com/products-services-recombinant-proteins/active-protein-kinases