ISOSPIN Blood & Plasma DNA

全血、血清、血浆提取DNA试剂盒

　　ISOSPIN Blood & Plasma DNA 50次用量

　　ISOSPIN Blood & Plasma DNA 是能够从全血、血清、血浆中提取DNA的试剂盒。

　　使用本产品能有效地在30分钟内提取出DNA。利用在高离序盐状态下DNA能吸附在二氧化硅的原理，无需苯酚和氯仿等有毒有机溶剂。通过离心柱提取DNA，简单的操作就能获得稳定产量的高品质DNA。

　　本产品不仅能从血液中提取染色体组DNA，也能提取循环DNA、及长期保存中出现断片化的DNA。

◆特点

　　•　能从各种血液样本中提取DNA

　　•　有效回收断片化的DNA、循环DNA

　　•　使用离心柱仅需30分钟，操作简单

　　•　无需苯酚和氯仿等有毒有机溶剂

　　•　柱容量大（900 µL），便于提高容量

◆产品组成

ISOSPIN Blood & Plasma DNA （50次用量）

◆运送方法

　　从NIPPON GENE直接输送的情况下，放入室温品和冷藏品的试剂盒与放入－20°C干冰塑料盒装入纸箱中并在常温下进行输送。

◆使用实例

简易步骤

Data 1: 从各种血液样本提取DNA

　　使用ISOSPIN Blood & Plasma DNA 与其他公司产品从各种200 µL血液样品中提取DNA。实验按照各提取试剂盒指南进行，均取80 µL洗提液量，以进行回收量的比较。

各种血液样本： 　　①　人 EDTA2Na 保存血液 　　②　人 EDTA2K 血液 　　③　人肝磷脂血液 　　④　人柠檬酸钠血液 　　⑤　马保存血液 　　⑥　绵羊保存血液

　　①…使用冷冻保存血液

　　②,③,④…采血后，当天进行提取

　　⑤,⑥…采血后与含有柠檬酸钠等物质的保存液以1：1的比例混合为保存血液使用

结果

　　ISOSPIN Blood & Plasma DNA与其他公司产品相比在各种血液样本中回收DNA有相同或更高的回收量。

Data 2：血浆中提取循环DNA

　　使用ISOSPIN Blood & Plasma DNA 与其他公司产品从240 µL母体血浆中提取循环DNA，用实时PCR定量于Y染色体上的胎儿遗传基因（DYS14及SRY）。实验按照各提取试剂盒指南进行，均取30 µL洗提液量，并进行比较。

结果

　　ISOSPIN Blood & Plasma DNA比其他公司产品在血浆样本中，循环DNA有更高的回收量。

◆使用注意

　　•　本产品仅用于实验研究，不能作医药及其他目的使用。

　　•　不熟悉试剂相关基础知识的人士请勿操作。

　　•　请按照指南记载内容操作使用本产品。

　　•　因不按照指南操作而导致的问题，Nippon Gene公司恕不负责任。

◆资料 Data Sheet

产品指南

　　•　ISOSPIN Blood & Plasma DNA (PDF 377 KB)

SDS(Safety Data Sheet)

　　•　ISOSPIN Blood & Plasma DNA (PDF)

宣传册子

　　•　ISOSPIN Blood & Plasma DNAパンフレット（PDF 1.1MB）

◆相关产品

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碱性磷酸酶染色试剂盒II

　　胚胎干细胞（ES）和诱导多能干细胞（iPS）的未分化状态可以通过高水平的碱性磷酸酶（AP）表达来表征，所述碱性磷酸酶（AP）表达与其他表面标志物的表达一起表明具有自我潜力的未分化细胞-renew.AP是在碱性条件下负责脱磷酸化分子如核苷酸，蛋白质和生物碱的水解酶。 当使用AP染色试剂盒对固定的ES或iPS细胞染色时，未分化的细胞呈现红色或紫色，而分化的细胞呈现无色。

◆试剂盒组成

　　固定溶液:  25 mL (Cat. No. 09-0042)

　　AP染色溶液A：10mL（目录号09-0043） 
　　AP染色溶液B：10mL（目录号09-0065） 

　　AP染色溶液C：10mL（目录号09-0066）

◆储存和稳定性

　　在4°C储存， 不要冻结。 

◆质量控制

　　AP染色试剂盒II在人类和小鼠ES细胞上进行功能测试，以确保产品质量。

参考文献

Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol（25:24:1）

苯酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）

◆说明

本产品是TE饱和苯酚、氯仿、异戊醇按25：24：1比例混合液。用于生物体组织提取核酸和去除核酸的酶反应后的蛋白质。减少异戊醇在使用时产生的气泡。 　　本产品使用的TE饱和苯酚（苯酚66%）中苯酚预先用TE使其达到饱和，所以含有8-羟基喹啉。

◆用途

　　生物体组织提取核酸和去除核酸的酶反应后的蛋白质等。

◆内容

　　苯酚、氯仿、异戊醇（25：24：1）（250mL）

◆使用注意事项

◆使用案例

　　Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (25：24：1)的状态

　　本产品是双层分离液体。请使用下层的苯酚层。

　　无色上层：TE

　　淡黄色下层：Phenol/Chloroform/Isoamyl

苯酚处理案例

　　核酸水溶液（200μL）

　　↓←Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol (25：24：1),等量(200 μL) 添加

　　↓混合

　　↓离心分离（11000× g，5-15分钟）

　　↓上层为含有核酸的透明水层，下层为黄色苯酚层，中间层为白色蛋白质

　　↓

　　将水层转移到新管（请注意不要吸取中间层）

◆备注

　　本产品为实验研究用试剂，请勿用作医药品。

　　苯酚产品在收货日起可保存6个月（未开封可保存一年）。

　　在含有8-羟基喹啉的苯酚层是亮橙色（黄色）。随着氧化过程会变成带暗红色的橙色。请避免使用氧化后的产品。

相关产品

参考文献

Sambrook, J. et al. :Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2nd ed. (1989)

Long ssDNA Preparation Kit (LsODN Preparation Kit)

长单链DNA（ssDNA）制备试剂盒

　　本产品使用Nicking切口酶法（正在申请专利的新技术），是制备高纯度且有正确序列的长单链DNA（ssDNA, 1500 base或3000 base）的试剂盒。

　　※本产品不含凝回收试剂盒。
　　※本产品用于研究，不可用于临床实验。

◆关于ssDNA的制备

　　ssDNA运用广泛，但由于制备是有PCR和使用合成DNA的寡聚体，核酸外切酶反应，逆转录酶反应等工序，无法避免内部突变和末端缺失等问题的发生。虽然纯化使用聚丙烯酰胺变性凝胶电泳以及链霉亲和素包被的磁珠等方法，但还是会出现混入大量dsDNA的情况。
　　Long ssDNA Preparation Kit (LsODN Preparation Kit)，通过简单的操作，便可获得含有目的序列的高纯度长链ssDNA。

◆特点

　●　不含有变异或末端缺失，可制备1,500 base或者最长到3,000 base的长链ssDNA。

　●　全程操作与普通的dsDNA片段制备法相同，无需准备特殊的机器以及试剂。

　●　通过附加的Denaturing Gel-loading Buffer（变性凝胶上样缓冲液）进行变性，可以使用琼脂糖凝胶电泳对目的长链ssDNA进行分离纯化。

　●　凝胶电泳配有已染色的RNA作为分子量标记。

◆试剂盒的内容

◆质粒图谱

◆原理和操作方法

◆使用例

　　使用Long ssDNA Preparation Kit (LsODN Preparation Kit)制备的1,500 base和3,000 base的长链ssDNA。

　　将目的dsDNA片段(1,500 bp或者3,000 bp)在pLSODN -1或pLSODN-3的MCS（Nt.BspQI位点与Nb.BsrDI位点之间）克隆后，使用切口酶（Nt.BspQI和Nb.BsrDI）对其处理，在目的片段的两端出现切口。变性后，样品经琼脂糖凝胶电泳分离，从目的条带提取DNA，纯化。将所有的样品通过变性凝胶上样缓冲液进行变性后，再进行电泳。

　　Lane 1：已导入1,500 bp DNA片段的pLSODN-1通过切口酶处理后的样品
　　Lane 2：已纯化的长链ssDNA (1,500 base)
　　Lane 3：已导入3,000 bp DNA片段的pLSODN-1通过切口酶处理后的样品
　　Lane 4:：已纯化的长链ssDNA (3,000 base)

相关资料

说明书

相关产品

◆Funa凝胶枪和切片凝胶专用吸管

　　通过简单操作能将琼脂糖凝胶电泳后的DNA和蛋白质带部分回收的枪头以及专用短移液器。

详情请看下图：

长单链DNA（ssDNA）制备试剂盒的使用文献

　　ssODN-mediated knock-in with CRISPR-Cas for large genomic regions in zygotes
　　Yoshimi K, Kunihiro Y, Kaneko T, Nagahora H, Voigt B, Mashimo T. Nature Communicatons.Jan;20;7:10431 (2016).

　　使用切口酶法（本产品）制备的长链ssDNA（包含了2Apeptide序列，GFP全域序列，5'端300个碱基同源臂，3'端60个碱基同源臂，全长1,194 base的互补单链DNA）以及附加了poly（A）的Cas9-poly(A)RNA，向导RNA：向大鼠受精卵显微注射Thy1-TGA，在大鼠rThy1基因C末端处高效率地将绿色荧光蛋白基因（GFP基因）全域成功敲入。本论文也是首次表明，使用长链ssDNA的lsODN法（对应ssODN的lsODN）能够提高外源基因全长的敲除效率。

免疫印迹用化学发光试剂ImmunoStar^® 系列

ImmunoStar^® Zeta

ImmunoStar^® LD

ImmunoStar^® 系列是检测过氧化物酶（HRP;POD）标记抗体的免疫印迹用化学发光试剂。

为适应各种实验系统，我们推出了Basic、Zeta和LD三种试剂。

◆ImmunoStar^® 系列选择指南

◆ImmunoStar^® Zeta

　　这是一款非常重视——发光强度、发光稳定性和定量动态范围3者平衡的高灵敏度发光试剂。它在显示强发光信号的同时能持续稳定地发光。而且能在广泛的蛋白数量范围中获得较高线性的标准曲线。

发光强度及发光稳定性

　　梯度稀释FLAG-BAP，再与其他公司的产品B（高灵敏度产品）的发光强度及发光稳定性作对比。ImmunoStar^® Basic显示出的发光信号与其他公司的产品B（高灵敏度产品）相同，但能更持续稳定地发光。

定量动态范围

　　梯度稀释FLAG-BAP，对比其他公司的产品B的定量动态范围。在与其他公司的产品B同样的蛋白数量范围中ImmunoStar^® Basic能作出较高线性的（R2＝0.99以上）标准曲线。

样本：FLAG-BAP

凝胶：SuperSepTMAce，10~20%，13孔（产品编号：191-15031）

膜：ClearTrans^® SP的PVDF膜，疏水性（产品编号：033-22453）

一次抗体：抗DYKDDDDKTag，单克隆抗体（产品编号：014-22383），稀释1,000倍

二次抗体：过氧物酶标记的兔抗鼠IgG抗体（产品编号：018-23643），稀释10,000倍

*定量分析作出能获得R2＝0.99以上的标准曲线，该范围同时适用于将已测量的目标试剂。

◆与其他公司的产品进行比较 发光强度及发光稳定性

　　发光强度与其他公司Femtogram级别产品（其他公司的产品D，E）相同水平。而且，在从反应开始90分钟后的检测中，能保持与发光持续性优良的其他公司的产品D相同的发光程度。

样本：FLAG-BAP

凝胶：SuperSepTMAce，10-20%，17孔（产品编号：198-15041）

一次抗体：抗DYKDDDDKTag，单克隆抗体（产品编号：014-22383），稀释4,000倍

二次抗体：过氧物酶标记的兔抗鼠IgG抗体（产品编号：018-23643），20,000倍稀释

曝光时间:60秒（LAS4000，standard）

◆产品列表

ImmunoStar^® LD

　　这是一款发光强度突出的高灵敏度发光试剂。适用于检测低表达蛋白等微量蛋白。

发光强度

样本：FLAG-BAP

凝胶：SuperSepTM Ace，10-20%，17孔（产品编号：198-15041）

一次抗体：抗DYKDDDDK Tag，单克隆抗体（产品编号：014-22383），稀释2,000倍

二次抗体：过氧物酶标记的兔抗鼠IgG抗体，稀释20,000倍（产品编号：018-23643）

曝光时间：60秒（LAS4000，standard）

ImmunoStar^® LD比其他公司的产品B及ImmunoStar^® Zeta能更高灵敏度地检测FLAG-BAP。

发光稳定性

　　将1μL稀释8万倍的Anti-Mouse Immunoglobulins/HRP(DAKO, Code No.P0260)加入荧光・发光板中（康宁，Code No.3915），再加入发光试剂各50μL，最后用光度计(TECAN Ultra Evolution)进行测量。

　　反应进行120分钟后的发光强度比反应进行5分钟后的反应强度减弱了61%。

定量动态范围

　　梯度稀释FLAG-BAP，检测出获得较高线性标准曲线的蛋白数量范围。ImmunoStar^® LD在0.39～6.25ng的蛋白数量范围中显示出高线性（R2＝0.99以上）。

　　ImmunoStar^® LD的发光强度非常强，信号的减弱速度也相对较快，定量动态范围比ImmunoStar^® Zeta小。所以，定量分析目标抗原时最好使用ImmunoStar^® Basic或Zeta。

样本：FLAG-BAP

凝胶：SuperSepTMAce，10~20%，13孔（产品编号：191-15031）

膜：ClearTrans^® SP PVDF膜，疏水性，0.2μm（产品编号：033-22453）

一次抗体：抗DYKDDDDKTag，单克隆抗体（产品编号：014-22383），稀释1,000倍

二次抗体：过氧物酶标记的兔抗鼠IgG抗体（产品编号：018-23643），稀释40,000倍

*定量分析作出能获得表示决定系数R2＝0.99以上的线性的标准曲线，该范围同时适用于将已测量的目标试剂。。

在抗原量0.39～6.25ng（Lane No.1～5）的范围内，R2=0.99以上（1.2order）。

◆产品列表