procomcure PCCSKU1032说明书
VitaTaq®HS PCR试剂盒
仅供研究使用
Procomcure Biotech GmbHwww.procomcure.com office@procomcure.com
VitaTaq®HS DNA聚合酶是一种耐用可靠的Taq DNA聚合酶，适用于所有常见的PCR应用，如菌落PCR、克隆应用、高通量PCR和常规PCR。其抗体介导的HotStart功能允许在室温下进行反应设置，并*控制反应开始。
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产品 |
尺寸 |
皮肤单位 |
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200 U |
PCCSKU1032 |
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VitaTaq®HS PCR试剂盒 |
500 U |
PCCSKU1033 |
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2500 U |
PCCSKU1034 |
储存条件
将所有组分储存在-20 ℃下，避免反复冻融循环。
所需的其他材料
无核酸酶dH2O
无核酸酶PCR管/板和密封选项热循环仪
PCR引物（各10µM）dNTP混合物（各10 mM）模板DNA
反应设置
- 将所有反应组分*解冻并轻轻混合，以确保所有组分均匀分布。在无菌、无核酸酶试管中制备反应液，加入聚合酶后轻轻混合。通过快速旋转收集试管底部的所有液体。
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组件 |
体积 |
终浓度 |
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10X PCR缓冲液 |
5 µl |
1X |
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dNTP混合物（各10 mM） |
0.5 µl |
各0.1 mM |
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引物1(10µM) |
1 µl |
0.1 µM – 0.5 µM |
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引物2(10µM) |
1 µl |
0.1 µM – 0.5 µM |
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VitaTaq®HS DNA聚合酶(2 U/µL) |
0.5 µl |
1 U |
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模板DNA |
1 µl |
<1 µg |
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dH2O |
to 50 µl |
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2) 根据这些指南进行循环：
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步骤 |
周期 |
温度 |
持续时间 |
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初始变性 |
1 |
94°C |
5 min |
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30-35 |
94°C |
30秒 |
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扩增 |
Tm-5 ℃ |
30秒 |
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72°C |
1 min/kb |
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终扩展 |
1 |
72°C |
5 min |
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保持 |
1 |
4°C |
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3) 使用适当百分比的丙烯酰胺或琼脂糖凝胶通过凝胶电泳分析扩增反应。